酵母核酸是從天然酵母中提取的核糖核酸，目前主要套用於醫藥、保健食品以及嬰幼兒食品中，隨著現代生物提取技術的發展，酵母核酸套用趨於廣泛，尤其在抗癌新藥、保健品及嬰幼兒食品等方面取得了不少突破。酵母核酸產業的發展將成為生物產業的一個亮點。
基本介紹
- 中文名：酵母核酸
- 別名：酵母RNA
- 特點：遺傳物質
- 用途：抗癌新藥等
- 目的：加深對核酸性質的認識
介紹,提取,目的,原理,實驗材料,操作步驟,
介紹
酵母核酸又稱為酵母RNA，是從天然酵母中提取的核糖核酸。酵母由於種屬不同，自身所含的核酸（RNA）由3——15%不等，核酸是重要的遺傳物質，對生命體的意義非常重大（可以參照百科核糖核酸的介紹），因此近年來，國內外一些酵母生產的大公司，都先後依靠自身的酵母資源對酵母進行深加工綜合利用，生產酵母核酸產品。
酵母核酸是通過現代生物提取技術，將酵母中的核酸分離純化，使核酸的純度達到85%以上的產品，其目前主要套用於醫藥、保健食品以及嬰幼兒食品中。市面上銷售的酵母核酸分為粉體和膏體兩種形態，含量從85——95%不等，含量越高價格越貴。在國外酵母核酸的生產主要集中在巴西，我國每年進口巴西的酵母核酸大概在800噸左右，價值2—3億，酵母核酸產品屬於潛力產品，套用面不斷擴大，市場處於供不應求的局面，因此在國內一些與酵母相關的公司也紛紛開始生產，但由於原料的不同產品質量層次不同。一些啤酒生產廠家利用生產啤酒的所剩的啤酒廢酵母提取酵母核酸，因為原料質量差，產品質量很不穩定，一般酵母核酸的含量只有50%左右，而且相對轉換率低，對後續生產加工影響大，因此國內的醫藥廠家只能高價購買國外的酵母RNA產品，隨著自身技術的進步。
酵母核酸套用趨於廣泛，尤其在抗癌新藥方面，作為前體合成物質；在嬰幼兒食品中，酵母核酸經過降解後的核苷酸，對嬰幼兒的生長發育尤為重要；在保健品中可以提高免疫、抗疲勞。酵母核酸產業的發展將是生物產業的另一個亮點。
提取
目的
學習和掌握從酵母中提制RNA 的原理和方法，從而加深對核酸性質的認識。
原理
提取和製備RNA 的首要問題是選RNA 含量高的材料。微生物是工業上大量生產核酸的原料，其中RNA 的提制以酵母最為理想，因為酵母核酸中主要是RNA（2.67～10.0%），DNA 很少（0.03～0.516%），而且菌體容易收集，RNA 也易於分離。此外，抽提後的菌體蛋白質（占乾菌體的50%）仍具有很高的套用價值。
RNA 提制過程首先要使RNA 從細胞中釋放，並使它和蛋白質分離，然後將菌體除去。再根據核酸在等電點時溶解度最小的性質，將pH 調至2.0～2.5，使RNA 沉澱，進行離心收集。然後運用RNA 不溶於有機溶劑乙醇的特性，以乙醇洗滌RNA 沉澱。提取RNA 的方法很多，在工業生產上常用的是稀鹼法和濃鹽法。稀鹼法利用細胞壁在稀鹼條件下溶解，使RNA 釋放出來，這種方法提取時間短，但RNA 在稀鹼條件下不穩定，容易被鹼分解；濃鹽法是在加熱的條件下，利用高濃度的鹽改變細胞膜的透性，使RNA 釋放出來，此法易掌握，產品顏色較好。使用濃鹽法提出RNA 時應注意掌握溫度，避免在20～70℃之間停留時間過長，因為這是磷酸二酯酶和磷酸單酯酶作用的溫度範圍，會使RNA 因降解而降低提取率。在90～100℃條件下加熱可使蛋白質變性，破壞磷酸二酯酶和磷酸單酯酶，有利於RNA 的提取。
實驗材料
1．實驗材料
活性乾酵母；pH0.5～5.0 的精密試紙；冰塊。
2．儀器
（1）藥物天平
（2）三角瓶（100mL）
（3）量筒（50mL）
（4）水浴鍋
（5）電爐
（6）試管木夾
（7）離心管
（8）離心機（4 000r/min）
（9）燒杯（250mL, 50mL, 10mL）
（10）滴管及玻棒
（11）吸濾瓶（500mL）
（12）布氏漏斗（60mm）
（13）表面皿（8cm）
（14）烘箱
（15）乾燥器
（16）紫外可見分光光度計
3．試劑
（1）NaCl（化學純）
（2）6mol/L HCl
（3）95%乙醇（化學純）
操作步驟
1．提取
活性乾酵母粉5g，倒入100mL 三角瓶中，加NaCl 5g，水50mL，攪拌均勻，置於沸水浴中提取1h。
2．分離
將上述提取液取出，立即用自來水冷卻，裝入大離心管內，以3 500r/min 離心10min，使提取液與菌體殘渣等分離。
3．沉澱RNA
將離心得到的上清液傾於50mL 燒杯中，並置於放有冰塊的250mL 燒杯中冷卻，待冷至10℃以下時，用6mol/L HCl 小心地調節pH 至2.0～2.5。隨著pH 下降，溶液中白色沉澱逐漸增加，到等電點時沉澱量最多（注意嚴格控制pH）。調好後繼續於冰水中靜置10min，使沉澱充分，顆粒變大。
4．抽濾和洗滌
上述懸浮液以3 000r/min 離心10min，得到RNA 沉澱。將沉澱物放在10mL 小燒杯內，用95%的乙醇5～10mL 充分攪拌洗滌，然後在鋪有已稱重濾紙的布氏漏斗上用真空泵抽氣過濾，再用95%乙醇5～10mL 淋洗3 次。由於RNA 不溶於乙醇，洗滌不僅可脫水，使沉澱物疏鬆，便於過濾、乾燥，而且可除去可溶性的脂類及色素等雜質，提高了製品的純度。
5．乾燥
從布氏漏斗上取下有沉澱物的濾紙，放在8cm 表面皿上，置於80℃烘箱內乾燥。將乾燥後的RNA 製品稱重。
6．含量測定
稱取一定量乾燥後的RNA 產品配製成濃度為10～50μg/mL 的溶液，在751 型分光光度計上測定其260nm 處的光密度值，按下式計算RNA 含量：
酵母核酸提取式中：OD260nm 為260nm 處的光密度值；L 為比色杯的光徑（cm）；0.024 為1mL 溶液含有1μg RNA 的光密度值。
結果計算
根據含量測定的結果按下式計算提取率：
酵母核酸提取