《過繼特異性同種CTL清除巨細胞病毒感染》是依託華中科技大學，由張彩娥擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：過繼特異性同種CTL清除巨細胞病毒感染
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張彩娥
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
慢性病毒感染直接危害著人類的健康，已成為危害公共衛生的一大難題。在慢性病毒感染過程中，機體CD8+ T細胞對慢性感染病毒表現為不應答或弱應答。以誘導或激活患者自身病毒特異性細胞毒性T細胞（CTL）為目的的免疫治療方案並不能有效的清除慢性感染病毒。研究提示同種反應性T細胞也具有pMHC特異性，同種反應性T細胞庫中存在針對病毒表位的特異性T細胞，為打破長期病毒感染引起的耐受提供了新的途徑。本項目擬建立鼠巨細胞病毒（MCMV）慢性感染模型，通過pMHC二聚體技術構建人工抗原提呈細胞（APC），在體外製備針對病毒優勢表位的特異性同種CTL，過繼慢性感染小鼠，探討病毒特異性同種CTL清除宿主體內慢性感染病毒的作用。
結題摘要
慢性病毒感染直接危害著人類的健康，已成為危害公共衛生的一大難題。由於病毒感染引起的自身耐受，通過傳統的激活患者自身的T細胞的的治療思路並不能產生有效的清除病毒作用。本項目改變傳統病毒免疫治療的思路，擬體外誘導並大量擴增出病毒抗原特異性的同種CTL進行過繼免疫治療，清除病毒感染。探討病毒特異性同種CTL對慢性病毒感染的清除作用。為此成功構建H-2Kb/IgG2aFc/β2m二聚體昆蟲表達質粒，轉染到昆蟲細胞Sf9中，並大量飼養該細胞，收穫上清，得到該蛋白，載入到MCMV優勢表位肽上，MCMV肽-巨噬細胞體內外聯合培養誘導Balb/c小鼠自身淋巴細胞產生單一pMHC特異性的同種CTL。體內外聯合刺激所產生的CTL具有單一pMHC特異性，並對特定靶細胞（MCMV肽/dimer -RMA/S）有特異性的殺傷作用，而對含有其它無關表位的靶細胞（OVA-RMA/S，RMA/S和SP2/0）無殺傷效應。將C57BL/6(H-2Kb) 巨細胞病毒（MCMV）的慢性感染小鼠作為受者，用獲得的pMHC特異性CTL通過尾靜脈過繼；對照組用H-2Kd小鼠的脾細胞進行過繼，過繼細胞量為1×107個。結果顯示特異性刺激（MCMV/dimer-Mφ）誘生的同種CTL細胞過繼受者感染MCMV的C57BL/6小鼠後，其腎臟內均未出現明顯的淋巴細胞浸潤。提示單一pMHC特異性CTL能夠在體外定向殺傷特定性狀的靶細胞，而體內殺傷特異性的靶細胞作用不是很顯著。
