連續流動無細胞系統

連續流動無細胞系統:可使外源基因高效表達的連續流動無細胞系統(continuous flow ellfee system,CFCF) 包括胺基酸、ATP 和GTP 等物質的供給液通過蠕動泵連續恆流速進人反應系統,同時產物也以同樣的速度經過超濾膜濾出,使其始終處於動態平衡狀態。由於CFCF 系統與標準的無細胞系統反應時間延長,產物大幅度提高,受到重視,並推動了體外無細胞系統的套用與發展。

目前商業化的無細胞合成體系成本依然比較高,需要進一步地研究以降低成本。當無細胞體系套用於代替傳統的體內基因表達方法大規模生產異源蛋白質時,由於需要充分長期補充能量和反應底物,從而增加了生產成本和降低了競爭力。近幾年來,隨著無細胞蛋白質合成系統中mRNA 穩定性的不斷提高、能量再生體系的不斷完善和反應器操作方式的不斷改進,一方面無細胞系統的成本大大降低,另一方面無細胞系統的蛋白質產量已有很大提高,已經有20小時反應得到mg/ml 級的可溶性目標蛋白的報導。因而,無細胞體系在體內難以表達的某些特殊蛋白質的大規模生產方面可能首先具有工業化套用的前景。

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