迭鞘石斛

迭鞘石斛（Dendrobium denneanum Kerr.）為蘭科石斛屬植物，是中藥石斛的來源之一，主要分布於我國四川、雲南、廣西等地，資源豐富，且易於人工栽培，目前在四川的樂山、雅安、洪雅等地已廣泛栽培，並已作為商品藥材廣泛流通於市場。

研究表現，迭鞘石斛中多糖類成分是其具有免疫增強和抗腫瘤作用的活性成分。

基本介紹

• 中文學名：迭鞘石斛
• 別稱：疊鞘石斛 
• 科：蘭科石斛屬植物
• 分布區域：我國四川、雲南、廣西等地，
• 類型：藥品

特性描述

莖圓柱形，長25～35厘米，粗4毫米以上，不分枝，具多數節。葉互生，革質，線形或狹長圓形，長8～10厘米 ，寬1.4～1.8厘米，基部具鞘；葉鞘緊抱於莖。總狀花序側生於莖的上端，長4～8厘米，具3～5朵花，花苞片膜質，淺白色，舟狀；花橘黃色，開展；中萼片長圓狀橢圓形，先端鈍，全緣，極5條脈；側萼片長圓形，先端鈍，具5條脈；花瓣橢圓形或寬橢圓狀倒卵形，長2.4～2.6厘米，寬1.4～1.7厘米，先端鈍，全緣，具3條脈；唇瓣近圓形，長2.5厘米，寬約2.2厘米，上面具有密布絨毛和一個大的紫色斑塊，邊緣具不整齊的細齒。

迭鞘石斛

花期

5～6月。

生生

于海拔600～1700米的山地雨林大樹上。

產地

五指山、昌江霸王嶺等地。主要分布於我國四川、雲南、廣西、海南、台灣和貴州等地。

藥用價值

迭鞘石斛 (Dendrobium denneanum)為傳統中藥材,主要有抗腫瘤、抗氧化、降血糖的作用.為了進一步研究其化學成分,採用矽膠柱色譜和製備高效液相色譜等方法從迭鞘石斛 95%乙醇提取物的氯仿和正丁醇萃取物中分離得到10個單體化合物,根據理化性質和波譜數據鑑定其為:香豆素(1)、moscatin(2)、胸苷 (3)、反式丁香苷(4)、二氫丁香苷(5)、2,4,6-三甲氧基苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖(6)、(+)丁香脂素-O-β-D-吡喃葡萄糖 (7)、3-羥基-1-(4-羥基-3,5-二甲氧基苯基)-2-[4-(3-羥基-1-(E)-丙烯基)-2,6-二甲氧基酚]丙烷基-7-O-β- D-吡喃葡萄糖苷(8)、picraquassioside C(9)和citrusin B(10).其中3-10均為首次從該植物中分離得到。

本文對其正丁醇部分的化學成分、石斛多糖的單糖組成 以及提取物和5個單體化合物的抗氧化活性進行了研究，並對石斛屬植物的化學成分和藥理活性研究進行綜述。具體內容如下：通過反覆矽膠柱層析、MCI、凝膠柱色譜和製備HPLC等分離手段，從迭鞘石斛95%乙醇提取物正丁醇萃取物中分離得到了21個化合物，利用化學方法、電 噴霧質譜和核磁共振等現代波譜學方法鑑定了化合物的結構。其中6個為新化合物，它們分別為2-O-β-D-吡喃葡萄糖-5-羥基-4-甲。

成分

迭鞘石斛中含有生物鹼、糖類、苷類、菲類、聯苄類、芴酮類、香豆素類、酚類和三萜類化合物[1,2,3]。

主治症狀

正迭鞘石斛為蘭科(Orchideceae)石斛屬(Dendrobium)植物迭鞘石斛(Dendrobiumdenneanum)的新鮮或乾燥莖,是四川著名道地藥材"嘉定石斛"的主要品種,別名"黃草",具有益胃生津,滋陰清熱的功效。該品味甘,微寒,歸胃、腎經,用於陰傷津虧、口乾煩渴、食少乾嘔、病後虛熱、目暗不明等,現代藥理研究表明,迭鞘石斛具有增強機體免疫能力、抗腫瘤、降血糖、抗氧化、促進胃腸運動和擴張血管等多種藥理活性,臨床上多用於治療眼科疾病。

鑑別

（1）顯微鑑別 本品橫切面、粉末顯微特徵明顯，故收入標準正文

（2）薄層色譜鑑別 以迭鞘石斛對照藥材進行薄層色譜研究，供試品溶液及對照品溶液的製備、吸附劑、檢視方法同標準正文，分別採用甲苯－乙酸乙酯－丙酮－甲酸（8 :2 :1 :0.05）和環己烷－三氯甲烷－乙酸乙酯—甲酸（10 :15 :15 :0.2）為展開劑，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，均能檢出相同顏色的斑點，前者斑點清晰、Rf值適中，收入標準正文。

迭鞘石斛中總多糖的

含量測定

為完善藥材質量評價方法及提高藥材的質量標準，本文採用苯酚-硫酸比色法，對迭鞘石斛中的石斛總多糖進行定量分析測定，為迭鞘石斛藥材的質量評價提供依據。

材料、儀器與試藥

1.1 材料迭鞘石斛藥材於2007年5月自購於四川省夾江縣華頭鎮，經成都中醫藥大學中藥鑑定教研室陳新副教授鑑定其為蘭科植物迭鞘石斛Dendrobium denneanum Kerr.的乾燥莖。

1.2 儀器與試藥UV-1100紫外-可見分光光度計（上海天美科學儀器有限公司）；BP121S電子分析天平（萬分之一）（德國Sartorius公司）；BP211D電子分析天平（十萬分之一）（德國Sartorius公司）；SHB-Ⅲ循環水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）；R-21型旋轉蒸發儀（上海申勝生物科技有限公司）；苯酚、濃硫酸、乙醇等均為分析純（成都科龍化工試劑廠）。

方法與結果

2.1 溶液的製備

2.1.1 對照品溶液的製備精密稱取 105℃乾燥至恆重的葡萄糖對照品10.30mg，置 100mL容量瓶中加適量蒸餾水溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL含葡萄糖0.1030mg）。

2.1.2 供試品溶液的製備取迭鞘石斛粗粉2.5g，精密稱定，置於圓底瓶中，加80%乙醇100mL回流提取1小時，趁熱過濾，藥渣揮乾，加蒸餾水85mL，回流1小時，趁熱過濾，用5ml熱水洗滌燒瓶和藥渣3次，待冷卻後移入250mL容量瓶中，用蒸餾水定容，搖勻，即得。

2.1.3 苯酚顯色液的製備將50mL濃硫酸緩緩加入10mL水中冷卻至室溫，加入0.6g苯酚晶體攪拌使其溶解，即得。

2.2 迭鞘石斛多糖的精製取迭鞘石斛粗粉50g，加入石油醚（60～90℃）250mL，回流提取1小時脫脂，過濾，揮乾溶劑，以80%乙醇回流提取1小時，趁熱過濾，揮乾溶劑，加入蒸餾水500mL回流提取2次，每次1小時，減壓濃縮至150mL，用0.1%的活性炭脫色，過濾，加入95%乙醇使溶液含醇80%，靜置過夜，沉澱物依次用無水乙醇、丙酮洗滌，60℃減壓乾燥，製得灰白色粉末狀迭鞘石斛多糖。

2.3 最大吸收波長的選擇分別精密稱吸取供試品溶液0.5mL、對照品溶液1.0mL分別置具塞試管中，加水至2mL，再加顯色液5.0mL，搖勻，放置5分鐘，置沸水浴中加熱30分鐘後，取出，迅速冷卻到室溫。另取2.0mL水作同上平行操作，作為空白對照，在400～600nm之間掃描。結果表明，對照品溶液和供試品溶液在490nm處有最大吸收峰，故選擇490nm作為測定波長。

2.4 標準曲線的製備精密移取對照品溶液0.1mL、0.2 mL、0.4 mL、0.8 mL、1.0mL分別置具塞試管中，按照“2.3.”項下方法，自“加水至2mL”起操作，另取2.0mL蒸餾水同法操作，作為空白對照，在490nm處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪製標準曲線。經計算得回歸方程為A=0.0506C+0.0631，相關係數r=0.9995。結果表明，葡萄糖濃度在1.47～14.7μg·mL^-1範圍內，線性關係良好。

2.5 顯色穩定性試驗取葡萄糖標準溶液1.0mL，按“2.3”項下操作顯色，在不同時間點測定其吸光度。結果表明，顯色在4小時內穩定性良好，結果見表1。表1 穩定性試驗結果Tab.1 Stability Test resultsT（h）00.51.02.03.04.0RSD(%)A0.5130.5070.5120.5100.5150.5160.65

2.6 換算因素的測定精密稱取60℃乾燥至恆重的迭鞘石斛多糖50.87mg置於100mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即可。精密吸取0.5mL，按照“2.3.”項下方法，自“加水至2mL”起操作，另取2.0mL水為空白，在490nm處測定吸光度。另精密吸取葡萄糖對照品溶液0.8mL，同法操作，測定吸光度。按照下面公式計算換算因素f=（W*1000）/C*D（其中W：稱取多糖的重量（mg）；C：溶液中單糖的濃度（μg·mL^-1）；D：稀釋因素，即稀釋後的總體積）。

2.7 精密度試驗精密吸取對照品溶液1.0mL，照“2.3.”項下方法，自“加水至2mL”起操作，在490nm處測定吸光度，連續測定6次，其RSD=0.73%，表明儀器精密度良好，結果見表2。表2 精密度試驗結果Tab.2 Precision Test resultsN123456RSD(%)A0.5060.5120.5070.5100.5080.5160.73

2.8 加樣回收率試驗取已知含量的迭鞘石斛藥材6份，每份約0.1g，精密稱定，分別精密加入石斛多糖17mg，按樣品測定方法測定，計算，結果見表3。表3 加樣回收試驗結果Tab.3 Average recovery of Polysaccharide SamplesContent/mgAdded/mgFound/mgRecovery /%Average recovery/%RSD/%117.5117.4334.4598.6 98.6 1.15216.1516.5432.5199.5317.3417.3833.7497.2418.0217.8235.95100.3516.4916.3632.2798.2618.3618.1135.6897.8

2.9 樣品的測定 取各批迭鞘石斛藥材樣品（見表4）粉末各2.5g，精密稱定，按照“2.1”項下供試品溶液製備方法製備樣品溶液。精密吸取各樣品溶液0.5mL，按照“2.3”項下方法，自“加水至2mL”起操作，另取2.0mL水為空白，在490nm處測定吸光度。另精密吸取葡萄糖對照品溶液0.5mL，同法操作，測定吸光度。按照下面公式計算各樣品中石斛多糖的含量：多糖含量（%）=（C*D*f*10-6）/W *100%（其中C：樣品提取液中按標準曲線計算出的單糖濃度（μg·mL^-1）；D：稀釋因素，即稀釋後的總體積；f：換算因素；W：樣品重量（g）。）表4 不同批次藥材中石斛多糖含量測定結果（n=3）Tab.4 Results of determination of samples（n=3）SamplesContent/%117.21216.51316.12417.51

4批藥材中石斛多糖含量在16.12～17.51%之間。

討論

3.1 本文採用改進後的硫酸-苯酚法對多糖含量進行測定，傳統的硫酸-苯酚法的操作是：加5%苯酚溶液後，再加入濃硫酸，振盪顯色，加入濃硫酸時，系統顯色溫度相差較大，而造成相應的偶然偏差。而改進後的方法，由於先把水和硫酸混合，對濃硫酸起到了稀釋作用，待冷卻最後加入苯酚晶體，配成顯色液，通過沸水浴加熱來使其顯色，保證了反應系統溫度一致，很好地解決了檢測的重現性與準確度。

3.2 實驗過程中，僅收集到4批迭鞘石斛藥材，還需進一步擴大樣本量，才能全面反映各地藥材的質量信息。本研究為迭鞘石斛藥材的質量評價提供依據，為其進一步開發利用打下了基礎。