《轉基因豬製備技術》是2013年中國農業出版社出版的圖書，作者是魏慶信、鄭新民。
基本介紹
- 中文名：轉基因豬製備技術
- 作者：魏慶信、鄭新民
- 出版社：中國農業出版社
- ISBN：9787109181014
內容簡介,圖書目錄,
內容簡介
《轉基因豬製備技術》首先概述了轉基因動物和轉基因豬的產生、技術發展和套用概況，然後介紹了與轉基因豬製備相關的配子與胚胎操作技術以及基因工程技術。在此基礎上，著重闡述了轉基因豬的各種構建技術及檢測技術。
轉基因豬研究的最終目標是培育新品種並在養豬生產中套用，因此論述了在獲得原代轉基因豬之後，新品種培育的理論、方法和途徑。由於轉基因生物的安全性意義重大，《轉基因豬製備技術》將轉基因豬的安全調控技術及安全管理和安全評價作為獨立的兩章，分別進行了敘述和討論。《轉基因豬製備技術》突出了實用性和可操作性，將技術操作方面的內容作為重點，在闡述高技術層面操作的同時，兼顧了常規技術層面和基本技能的操作。《轉基因豬製備技術》可為農業、醫學和基礎生物學領域相關的研究、推廣、生產和管理人員提供參考，也可作為有關專業的本科生和研究生參考教材。
圖書目錄
序
前言
第一章 概述
第一節 轉基因動物的產生和發展
一、轉基因動物的產生
二、動物轉基因技術的發展
三、轉基因動物套用領域的拓展
第二節 轉基因豬技術現狀及套用前景
一、轉基因豬技術現狀
二、轉基因豬的套用現狀與前景
參考文獻
第二章 豬的配子與胚胎操作技術
第一節 豬精液的採集、保存和輸精技術
一、豬精液的採集
二、精液的質量檢查和評定
三、精液的保存
四、輸精技術
第二節 母豬的同期發情和超數排卵技術
一、母豬的同期發情技術
二、母豬的超數排卵技術
第三節 豬胚胎的採集和移植技術
一、胚胎的採集
二、胚胎的移植
第四節 豬卵母細胞體外成熟及體外受精技術
一、豬卵母細胞的採集
二、豬卵母細胞的體外成熟
三、豬精子的體外獲能
四、體外受精技術
五、胞質內單精注射技術
第五節 豬體細胞核移植（克隆）技術
一、供體細胞的選擇
二、供體細胞的製備方法
三、受體細胞的製備
四、核移植操作技術
五、融合及激活技術
六、手工克隆技術
七、重構胚的培養
八、重構胚的移植
九、豬體細胞核移植存在的問題及套用前景
第六節 豬的iPS技術
一、iPS細胞的製備技術
二、豬iPS技術的套用前景
三、iPS細胞目前存在的問題
第七節 配子與胚胎操作的環境控制
一、影響配子與胚胎操作的環境因素
二、滅菌技術
三、玻璃及塑膠製品的清洗
四、配子與胚胎操作室的設計及環境管理
參考文獻
第三章 豬的基因工程技術
第一節 轉基因豬表達載體的構建
一、目的基因及其全長序列的獲取
二、啟動子的選擇
三、報告基因
四、調控元件
五、動物基因工程常用載體
六、載體構建的一般流程
第二節 基因打靶技術及其策略
一、基因打靶載體的類型和構建方法
二、胚胎幹細胞基因打靶
三、體細胞基因打靶
四、基因打靶技術的發展及複雜調控
五、基因打靶技術的套用和展望
第三節 RNAi基因沉默載體的構建
一、RNAi的研究
二、RNAi的分子機制
三、shRNA表達載體構建
四、基因沉默技術在豬遺傳改良上的套用
第四節 其他豬基因組靶向修飾技術
一、鋅指核酸酶
二、TALEN
三、PhiC31整合酶
參考文獻
第四章 豬的轉基因技術
第一節 顯微注射法
一、原核胚的獲取
二、基因的顯微注射
三、注射胚的移植
四、原核注射法製備轉基因豬的效率
五、提高轉基因效率的措施
六、通過顯微注射法實現基因的定位修飾和整合
第二節 豬精子介導法
一、精子介導轉基因的機理
二、精子介導製備轉基因豬的方法
第三節 體細胞核移植介導法
一、供體細胞的選擇及建系
二、細胞的基因轉染
三、細胞篩選和陽性單克隆培養
第四節 逆轉錄病毒感染法
一、逆轉錄病毒載體的構建
二、利用逆轉錄病毒載體製備轉基因豬的路徑
第五節 其他製備轉基因豬的方法
一、精原幹細胞途徑
二、人工染色體技術
參考文獻
第五章 轉基因豬的檢測
第一節 可視化識別檢測
一、螢光標記
二、膚色標記
第二節 整合檢測
一、樣品的採集
二、DNA的提取
三、聚合酶鏈式反應（PCR）
四、DNA斑點雜交
五、Southerln印記雜交
六、外源基因整合位點的檢測——染色體原位雜交技術
七、轉基因整合拷貝數的測定
第三節 轉基因豬外源基因的轉錄分析——mRNA檢測
一、組織或細胞中總RNA提取
二、Northern印跡雜交
三、RNase保護分析
四、逆轉錄一聚合酶鏈式反應（RT-PCR）
五、RNA斑點雜交
第四節 轉基因豬翻譯水平——蛋白質產物檢測
一、蛋白質印跡技術
二、免疫組織化學檢測
第五節 轉基因豬表達產物的生物活性分析及功能測試
一、表達產物的生物活性分析
二、表達產物的功能測試
參考文獻
第六章 轉基因豬的安全調控技術
第一節 轉基因豬的安全性分析及解決方案
一、轉基因豬對食品均安全性分析及解決方案
二、轉基因豬對環境的安全性分析及解決方案
三、轉基因豬自身的安全性分析及解決方案
第二節 標記基因的刪除技術
一、hit and run法
二、雙置換法
三、位點特異性重組技術
第三節 組織特異性表達
第四節 外源基因的誘導表達
一、四環素誘導表達系統
二、蛻皮激素誘導表達系統
三、他克莫司／雷帕黴素誘導系統
四、RU486誘導系統
參考文獻
第七章 轉基因豬新品種培育
第一節 外源基因在G0代中的整合狀況及遺傳穩定性
一、隨機整合
二、定位整合
第二節 G0代轉基因豬的選擇
一、選擇的內容和目標
二、選擇程式
第三節 轉基因豬純合子的建立
一、通過常規繁育技術建立轉基因豬純合子
二、通過重複打靶技術建立轉基因豬純合子
三、基因編輯技術
第四節 轉基因豬新品種的培育
一、轉基因豬新品種的培育目標
二、轉基因豬新品系的建立
三、轉基因豬新品種的建立
四、轉基因豬新品種的利用
五、轉基因豬種質資源的保存
參考文獻
第八章 轉基因豬的安全管理和安全評價
第一節 我國農業轉基因生物的安全管理體系
一、我國農業轉基因生物安全管理的法規建設
二、我國農業轉基因生物的管理和監控體系
第二節 轉基因豬的安全控制
一、轉基因實驗豬場的安全控制
二、轉基因實驗豬場的衛生防疫
三、轉基因實驗豬場豬群處置規則
第三節 轉基因豬的安全評價
一、轉基因豬安全評價的內容
二、各階段的申報程式
參考文獻
