《超聲破壞微泡靶向釋放HIF-1α shRNA聯合TACE治療肝癌的實驗研究》是依託華中科技大學，由張艷容擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：超聲破壞微泡靶向釋放HIF-1α shRNA聯合TACE治療肝癌的實驗研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張艷容
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
缺氧誘導因子1α（Hypoxia-inducible factor-1 alpha, HIF-1α）基因的激活和過度表達是經導管肝動脈栓塞化療術(transcatheter arterial chemoembolization, TACE)後肝癌復發和轉移的重要因素。因此，研究適當技術手段，儘可能地抑制HIF-1α的表達，是提高TACE治療效果的重點。本研究試圖構建針對HIF-1α的短髮夾狀RNA（small hairpin RNA，shRNA）表達質粒，將其包載於自製白蛋白微泡造影劑上，經肝動脈緩慢灌注攜治療基因的微泡，與此同時在病灶部位以超音波擊碎微泡，微泡破壞產生的空化效應將導致微血管破裂、內皮細胞間隙增寬、肝癌細胞膜通透性增加、shRNA質粒釋放入細胞，RNA干擾將特異性靜默HIF-1α基因。超聲輻照完畢後行TACE。探討一種能有效抑制肝癌TACE治療後復發和轉移的新方案。
結題摘要
背景：缺氧誘導因子1α(HIF-1α)基因的激活和過表達是經導管肝動脈栓塞化療術( TACE)後肝癌復發和轉移的重要因素。方法及內容：1、構建針對HIF-1α的短髮夾狀RNA(shRNA)表達質粒；2、體外缺氧培養大鼠肝癌細胞walker256，利用超聲靶向微泡破壞(UTMD)技術將質粒轉染至細胞內，觀察HIF-1α的沉默效果；3、構建wistar 大鼠肝癌模型。經大鼠尾靜脈注入shRNA表達質粒與SonoVue的混合液，同時在大鼠肝癌部位用合適的超聲條件擊碎微泡，將shRNA質粒釋放入細胞，觀察沉默HIF-1α基因表達的效果和腫瘤大小的變化；超聲輻照完畢後行TACE。實驗分組：非治療組、UTMD組、TACE組、UTMD+TACE組，對比分析各組對肝癌的治療效果。重要結果 1、HIF-1α shRNA表達質粒構建成功；2、體外實驗證實HIF-1α shRNA能夠有效抑制缺氧條件下walker256細胞內HIF-1α 的表達；3、體內實驗結果顯示：非治療組腫瘤持續增大，TACE組肝癌出現復發，UTMD組肝癌生長受抑制，TACE聯合UTMD組腫瘤生長抑制明顯，體積縮小，達到治癒肝癌的效果。關鍵數據 1、非治療組術前、術後三天、術後7天、術後14天的腫瘤大小分別為：401.2±245.4mm3、1225.9±547.6mm3、2742.3±1549.1mm3、4888.4±3226.6mm3；2、UTMD組術前、術後三天、術後7天、術後14天的腫瘤大小分別為：321.8±177mm3、688.3±409.4mm3、729.6±487.9mm3、594.3±497.5mm3；3、TACE組術前、術後三天、術後7天、術後14天的腫瘤大小分別為：499.3±377.5mm3、900.7±589.1 mm3、1677.6±1395.2mm3、3336.3±2563.9mm3；4、UTMD+TACE組術前、術後三天、術後7天、術後14天的腫瘤大小分別為：518.6±334.1mm3、771.4±419.9mm3、421.5±298.7mm3、236.7±262.1mm3。科學意義：UTMD能有效介導HIF-1α shRNA轉染至細胞內，沉默HIF-1α的表達，達到治癒肝癌、防止復發的目的，為基因治療提供新的方法和思路。
