基本介紹
- 中文名：貓細小病毒
- 外文名：Feline parvovirus
- 類型：細小病毒屬的一種致病菌
- 同義名：貓泛白細胞減少症病毒
病毒簡介,理化學特性,血凝性,培養,病原性,生態學,免疫,診斷,分離和鑑定,抗原的檢出,抗體的檢出,
病毒簡介
貓細小病毒 同義名：貓泛白細胞減少症病毒(Feline panleukopenia virus)，貓傳染性腸炎病毒，貓瘟病毒，貓泛白細胞減少症病毒(FPV)引起的傳染病以高熱、嘔吐、白細胞嚴重減少和腸炎為特徵。貓傳染性腸炎從本世紀三十年代起，就被一些歐、美學者發現。但病毒的首次分離培養是在1957年(Bilin)。後來Johnson(1964)從一頭患類似貓傳染性腸炎症狀的豹的脾臟分離出了同樣的病毒，並鑑定為細小病毒之後，才對本病的研究取得了顯著進展。通過對多種動物類似疾病的病原學研究，證明FPV在自然條件下感染貓科和鼬科多種動物，如虎、豹、獅子和浣熊，但以體型較小的貓科動物，包括水貂最為易感。FPV是目前本屬病毒中感染範圍最寬，致病性最強的一種。因此也是本屬中的主要病毒之一。
由FPV引起的貓泛白細胞減少症，可能存在於世界各地。在歐洲和北美已被認為是貓的重要傳染病之一。同時，本病毒還能侵襲屬於貓科的多種野生動物，因此，其分布的範圍之廣是可以想像的。中國張振興和李剛等人(1982～1984)報導，江蘇、安徽、山東、河南、河北、浙江、湖北、四川、陝西、山西等地均有本病發生，並先後從發病或死亡的貓和雲豹等動物中分離獲得了病毒。
理化學特性
病毒粒子外觀與本屬其它病毒相同，直徑20～24nm。核酸由單股DNA組成。DNA的分子量為1.7×10.6,G+C含量為47%。DNA分子量占有病毒粒子總量的28.5%。病毒粒子的分子量為5.9×10.6。衣殼可能由三種多肽組成，分子量為60kDa的占86%，73kDa的占10%，分子量最小的第三種多肽為39kDa，占3%～6%，衣殼中含有約5000nt的單鏈DNA。
象本屬其它病毒一樣，本病毒對外界因素具有強大的抵抗力。能耐受66℃30分鐘加熱處理。50%甘油鹽水中的含毒組織，在普通冰櫃內可保存35～138天。在25℃保存5天的含毒臟器，病毒滴度不降低。Earle液內的含毒組織，無論放置在4℃還是25℃，經13個月，毒力毫不降低。對乙醚、氯仿等脂溶劑和胰蛋白有抵抗性。0.5%福馬林能有效地殺滅病毒，是良好的消毒劑。
血凝性
本病毒系本屬中血凝性最弱者之一，僅在4℃下對猴和豬的紅細胞有凝集作用，此點在病毒鑑定上有一定意義。
培養
本病毒能在仔貓腎、肺、睪丸、脾、心、膈肌、腎上腺、腸、骨髓和淋巴結的培養物內增殖，其中以前三種臟器的細胞較為常用。除貓的細胞外，還能在來源於水貂和雪貂的組織細胞內增殖。同本屬其它病毒一樣，要在細胞形成單層以前接種病毒，才能達到病毒大量增殖的目的。雖能產生細胞病變，但在不染色的標本上難以識別，為此，可將放入培養瓶的蓋玻片(飛片)定期取出，經H.E.或Giemsa染色後進行鏡檢。當接毒劑量較大時，經10～12小時，首先出現核仁腫大，其外圍繞以清晰的暈環。經24小時，少數細胞出現核內包涵體，開始呈嗜酸性，逐漸變為嗜鹼性。細胞的形態變化往往是一過性的，當病毒周期性地增殖幾次以後，細胞外觀可能恢復正常。但也有部分研究者報導他們看到了明顯的細胞病變。這可能與毒株、接毒濃度、細胞種類、營養液和接種時間等因素有關。如據Johnson資料(1967)，有很多犢牛、豬、馬、犬的血清中，含有對本病毒增殖和形成細胞病變的耐熱性抑制物質，當細胞培養液中含有這種血清時，產毒量下降約千倍，細胞病變當然也會受到明顯的影響。
病原性
本病毒不僅能引起貓、水貂明顯的臨床症狀和很高的死亡率，而且能感染幾乎所有的貓科動物。血清學調查結果表明，許多這類動物的血清中，含有抗本病毒的特異性抗體，表明在自然情況下病毒在這些動物間的廣泛存在和傳播。
貓泛白細胞減少症是一種主要侵害幼貓的高度接觸性傳染病。潛伏期2～9天，平均4天。本病的臨床表現甚為多樣，分為特急性型、急性型、亞急性型和不顯型。特急性型不待發現臨床症狀即突然死亡，畜主往往懷疑為中毒。急性型可於24小時內死亡。亞急性型可持續數日到一周，呈雙相熱。第一期發熱時病畜體溫升高40℃左右，持續約一天，發熱平息後數天第二次發熱，體溫40℃以上，同時出現厭食、嘔吐、沉鬱、出血性腸炎和脫水等症狀，病貓多於5～6天死亡，死亡率一般為60%～70%。
在嚴重流行時幼貓幾乎全部死亡。病程超過6天以上的貓，有可能經過較長時間的恢復期後痊癒。
人工感染時，多種途徑(經口、鼻、皮下、靜脈、腹腔等)均能引起貓發病，尤其幼齡動物更為敏感。在體溫開始升高前不久，出現短時間的白細胞增多。第二次發熱後，白細胞嚴重減少，甚至在血液塗片標本上難以找到白細胞，故名貓泛白細胞減少症。正常貓血清中白細胞數為15000～20000個/mm3。白細胞數減少到8000個/mm3左右時，即可懷疑為本病，5000個/mm3以下時表示重症。2000個/mm3以下預後不良，以淋巴細胞和中性多核白細胞減少為主。
由於病毒對處於有絲分裂過程中的細胞有選擇親和性，所以大多數病變都發生在旺盛增殖的組織，如骨髓的幹細胞、淋巴細胞生成組織和腸黏膜。病毒對新生貓小腦內旺盛增殖的生髮細胞，具有選擇親和性，致使病貓發生共濟失調。當感染髮生於妊娠後期時，病毒能通過胎盤屏障，引起胎兒小腦發育不全、死亡和流產。
除特急性病貓外，剖檢可見脫水和消瘦變化。空腸和迴腸局部充血，脾腫大，腸系膜淋巴結水腫、壞死。多數病例長骨的紅髓變為液狀或半液狀，此點具有一定的診斷價值。組織學檢查時，於腸管上皮細胞可見嗜酸和嗜鹼性兩種包涵體，但病程超過3～4天以上者，往往消失。
生態學
在約一周的病毒血症期間，病畜的糞、尿和各種分泌液均含有病毒。被污染的食物、器具和衣服等均可引起疾病傳播，以經口為主，也能經飛沫傳染。康復貓的排毒期可持續數月到一年。除水平傳播外，已確認妊娠貓能發生對胎兒的垂直傳播。由於病畜發生病毒血症的時間長達5天以上，因此推測通過蚤類等吸血昆蟲的傳播也是可能的。
免疫
康復動物血液內的中和抗體緩慢持續升高，貓通常在感染後8天開始出現中和抗體，15天時滴度達1：16～1：60，30天可達1：150。實際觀察表明，本病的免疫力是堅強持久的，因為在自然情況下，很少能看到遭受第二次感染的動物。新生幼貓可從初乳獲得中和抗體，這種被動免疫可持續3～12周。
對歐、美地區貓群血清抗體的調查表明，陽性率可高達70%(滴度從1:5算起)。但在自然情況下，並未見有這樣多的貓發病，原因在於成年貓多為亞臨床感染，雖不顯症狀，但產生免疫反應。
診斷
根據臨床症狀、病理組織學變化(骨髓呈液狀、半液狀，小腸黏膜上皮細胞核內的包涵體)和白細胞減少等，可作出初步診斷。確診要靠病毒分離或免疫血清學試驗。
分離和鑑定
急性病例可採取血液和各種臟器或病畜的排泄物，作為分離病毒的病料。病死動物則以脾、小腸和胸腺最為適宜。
幼貓腎細胞最常用於病毒分離，原代和次代培養物均可。由於腎組織可能有潛伏帶毒的危險，試驗時必須設不接種病料的空白對照，並盲傳1～3代。在種入細胞後數小時即接種病料，因為病毒最適於在有絲分裂過程中的細胞內增殖。據一些研究者的資料，直接採取患畜自體的腎、肺、睪丸等臟器作病毒分離，最易獲得成功。由於細胞病變往往不明顯，可於接種病料後第3、4、5、6、7天，對培養細胞作H.E.染色後鏡檢，觀察有無核內包涵體。是否出現明顯細胞病變，主要與接種病毒的濃度有關。
套用已知標準毒株的免疫血清，在貓次代細胞培養物上進行中和試驗，是最好的病毒鑑定方法。由於細胞病變不明顯，以檢出核內包涵體為判定指標。於倍倍稀釋的免疫血清管內。加入等量的病毒懸液(100～300TCID5.0/0.1ml)，混勻，放37℃感作2小時，然後以0.2ml接種細胞培養管(於原代細胞作次代培養後2～3小時，每個稀釋度接種4管)，每個細胞管補充維持液至總量1ml(每管都裝有蓋玻片)，套用多孔培養板當然更為方便。放37℃培養4天，取出蓋玻片，作包涵體染色後鏡檢判定。
血凝抑制試驗儘管其敏感性不如血清中和試驗，但方法簡便，仍不失為一種理想的病毒鑑定和血清學診斷手段。只能用猴或豬的紅細胞，操作方法與一般常規相同。
抗原的檢出
取呈腸炎症狀病貓的糞便，以差速和超速離心處理提取病毒後，作免疫電鏡檢查。或取上述糞便直接或適當稀釋後，以3000r/min離心沉澱15分鐘，吸取上清液，加入等量氯仿，振盪10分鐘並如上離心沉澱後，取上清液直接進行負染後電鏡檢查，或加入免疫血清後作免疫電鏡檢查。取發病早期的病貓糞便進行血凝試驗，常有較高血凝價。取腸黏膜和淋巴組織，經冰凍切片後作免疫螢光抗體檢查，也可取得滿意結果。
抗體的檢出
血清中和、血凝抑制和補體結合反應等都可作為抗體的特異性診斷法。病癒後血清的效價要比病初血清高4倍以上才有診斷意義。
