性狀,作用與用途,用法和判定,貯藏,
性狀
本品為棕色疏鬆團塊,加PBS後能迅速溶解,不出現肉眼可見的凝塊。
作用與用途
用於診斷豬支原體肺炎的微量間接血凝試驗。
用法和判定
(1)用法a.首先用記號筆在72孔“V”型微量反應板的一邊標明被檢血清、陽性豬血清、陰性豬血清及抗原對照,各占一排孔。b.滴加稀釋劑 用微量移液器每孔加0.025mL稀釋劑。c.血清稀釋使用微量稀釋棒先在稀釋液中預濕後,經濾紙吸乾,再小心地蘸取被檢血清立於第一孔中,可以同時稀釋11個血清,以雙手合掌迅速搓動11根稀釋棒,達60次,然後將11根稀釋棒小心平移至第2孔,搓同樣轉速和次數,再移至第3孔(被檢血清可以只稀釋到第4孔,即血清稀釋到1:40),而陽性豬血清、陰性豬血清必須稀釋到第6孔。d.滴加抗原致敏紅細胞 用微量移液器吸取搖勻後的2%抗原致敏紅細胞懸液,每孔加0.025mL。e.抗原對照 為0.025mL稀釋液加0.025mL 2%抗原致敏紅細胞懸液,只做2孔。f.振盪加樣完畢後,置微型振盪器上振盪15-30s,室溫下靜置1-2h,觀察記錄結果。
(2)判定 以呈現“++”血凝反應的血清最高稀釋度作為血清效價判定終點。凝集反應強度標準如下:++++ 紅細胞在孔底凝成團塊,面積較大。+++ 紅細胞在孔底形成較厚層凝集,卷邊或鋸齒狀。++紅細胞在孔底形成薄層均勻凝集,面積較上二者大。出現“++’’以上凝集時為紅細胞凝集陽性。+ 紅細胞不完全沉於孔底,周圍少量凝集。± 紅細胞沉於孔底,但周圍不光滑或中心空白。 一 紅細胞呈點狀沉於孔底,周邊光滑。微量反應板靜置1-2h後,陽性對照豬血清效價應≥40“4-+”,陰性對照豬血清效價應1:10(即達到第2孔以上)時,判為陽性;效價<1:5時,判為陰性;介於二者之間時,判為可疑。
貯藏
在2-8℃,有效期為6個月;在-15℃為1年6個月。