調節磷是一種新型有機磷植物生長調節劑、灌木防除劑和除草劑,它既可用於森林、草原、機場等四周作灌木防除劑,也可用於城市綠化、灌木化學修剪,還可用於植物開花、結實、著色、生長調節等方面,用途廣泛。又因其極低的毒性、極佳的環境兼容性,適合於21世紀對農藥品種發展的要求。
調節磷肌球蛋白輕鏈激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)具有激酶和非激酶活性,在平滑肌收縮過程中起著關鍵酶調控的作用.為進一步闡明MLCK非激酶活性在平滑肌收縮過程中的調節作用,利用已刪除部分激酶區域的MLCK重組體(pGEXF6.5)在大腸桿菌中進行表達,採用親和層析技術純化表達的MLCK片段,套用EnzChek磷分析試劑盒檢測MLCK片段對磷酸化肌球蛋白、水解重酶解肌球蛋白(heavymeromyosin,HMM)及肌球蛋白亞片段1(subfragmentl,S1)ATP酶活性的影響,體外檢測MLCK片段對肌動蛋白肌絲運動的調節.研究結果顯示,pGEX-F6.5重組表達載體在大腸桿菌中以可溶性GST融合蛋白的形式表達.該融合蛋白經Glutathione-Sepharose4B純化、SDS-PAGE鑑定得到較純的單一表達條帶.純化的MLCK片段對磷酸化肌球蛋白、HMM和S1的ATP酶活性均有明顯激活作用.MLCK片段激活磷酸化肌球蛋白ATP酶活性為:Vmax=(19.426±1.669)倍;Km=(0.486±0.106)μmol/L,MLCK片段對磷酸化HMM和S1的ATP酶活性也有相似的刺激作用.體外肌絲運動研究表明,隨著MLCK片段濃度的增加,磷酸化肌球蛋白與肌動蛋白結合的數量不斷增加,肌絲運動的速度也隨之增加.上述結果表明,MLCK的C端非激酶活性具有調節磷酸化的肌球蛋白ATP酶活性及肌絲運動的作用.
調節磷是一種新型有機磷植物生長調節劑、灌木防除劑和除草劑,它既可用於森林、草原、機場等四周作灌木防除劑,也可用於城市綠化、灌木化學修剪,還可用於植物開花、結實、著色、生長調節等方面,用途廣泛。又因其極低的毒性、極佳的環境兼容性,適合於21世紀對農藥品種發展的要求。