《調節性B細胞在骨質疏鬆動物中促進種植體骨結合的研究》是依託上海交通大學，由王宇華擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：調節性B細胞在骨質疏鬆動物中促進種植體骨結合的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王宇華
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
絕經後骨質疏鬆（PMOP）患者由於持續發生病理性骨吸收，種植成功率低。炎症細胞Th17的功能亢進與骨吸收程度顯著相關，因此抑制Th17功能成為治療PMOP的熱點。調節性B細胞（Breg）是近年新發現的重要亞群，不但可直接抑制Th17細胞功能，還能促進Treg對Th17的抑制作用。目前Breg在PMOP中少見報導。本課題組前期研究已顯示：炎症細胞誘導的破骨細胞分化可被Breg所抑制，炎性骨吸收減少。為進一步探討Breg在PMOP中的調節機制，本項目擬首先構建PMOP模型，觀察疾病中Breg、Th17、Treg等的表達水平；其次，通過回輸體外增殖的Breg，研究Th17/Treg數量及相關基因的變化，闡明調控的作用和機制；最後評估炎症控制及骨結合水平，進一步分析和確證Breg/Th17/Treg調控通路對種植體周圍骨再生相關基因的影響，為控制種植區骨的炎症吸收,促進早期骨結合提供新的治療靶點。
結題摘要
絕經後骨質疏鬆（PMOP）患者由於持續發生病理性骨吸收，種植成功率低。炎症細胞Th17的功能亢進與骨吸收程度顯著相關，因此抑制Th17功能成為治療PMOP的熱點。調節性B細胞（Breg）是近年新發現的重要亞群，不但可直接抑制Th17細胞功能，還能促進Treg對Th17的抑制作用。目前Breg在PMOP中少見報導。本課題組以Breg的功能為核心研究內容，通過體外實驗確認了以P. gingivalis LPS (10 μg/ml) 和CpG (10μ M)聯合刺激來獲得Breg的增殖活化，並將其回輸入炎症性骨吸收的小鼠動物模型檢驗其功能及作用機理。實驗結果顯示P. g LPS和CpG的聯合刺激能顯著提高CD19+IL-10+細胞的數量，並驗證了CD1dhi CD5+ B是產生IL-10的主要細胞。通過卵巢摘除術建立PMOP小鼠模型後，可以發現小鼠外周血中的CD19+CD1dhi CD5+ B細胞、CD4+CD25+FoxP3+細胞降低時間點與IL-17+T細胞增加時間點一致，趨勢相反，呈現負相關聯繫。通過體內實驗，驗證體外回輸增殖的Breg能夠抑制P. g細菌相關的結紮模型的牙槽骨吸收。Breg抑制RANKL/OPG, TNF-α, and IL-1β 但是促進牙齦 IL-10mRNA的表達。採用Vivo track螢光標記技術，驗證了Pan B細胞胞在小鼠中會趨化至炎症區域，通過浸潤於牙齒周圍組織發揮作用。回輸活化的Breg至拔除一側第一磨牙的小鼠體內，12周后進行骨組織計量學測定回輸Breg的OVX小鼠顯著優於無回輸的OVX小鼠。骨組織形態學觀察顯示Breg回輸能有效改善PMOP小鼠的成骨。回輸Breg後的小鼠外周血中CD19+CD1dhighCD5+的細胞以及IL-10+Breg細胞的數量顯著高於未回輸的OVX小鼠。而未回輸Breg的OVX鼠外周血中IL-17+T細胞的數量顯著高於回輸Breg的鼠，具統計學差異。
