《調節性和效應性T細胞亞群參與膽道閉鎖發病及機制研究》是依託華中科技大學，由湯紹濤擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：調節性和效應性T細胞亞群參與膽道閉鎖發病及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：湯紹濤
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
近期文獻報導及申報者前期研究顯示：①膽道閉鎖（BA）與圍產期病毒感染觸發自身免疫應答所致膽管進行性損傷相關；②調節性T細胞（Treg）在自身免疫性肝病發生中發揮重要作用，病毒組分與Toll樣受體（TLR）結合可調控Treg細胞功能；③Th17細胞是參與自身免疫性炎症應答的主要效應性T細胞亞群，其與Treg間存在相互調節的網路。但有關Treg和Th17細胞參與BA發生的作用及其確切機制，尚未見研究報導。本項目研究目標為：①藉助流式細胞術、RT-PCR、Western blot分析BA患兒及動物模型外周血和肝內膽管組織中Treg和效應性T細胞亞群的數量、功能改變，及免疫細胞TLR表達，以探討BA的免疫學發病機制；②向BA動物模型輸注Treg細胞或給予抗IL-6抗體，或以Foxp3基因敲除鼠為模型，調控Treg/Th17細胞分化和功能，觀察對膽汁淤積發生和膽管損傷的影響，以探索防治BA的新策略。
結題摘要
目的：研究Treg和Th17細胞在膽道閉鎖（BA）患兒免疫炎症發展中的作用；並通過小鼠模型，觀察增加Treg細胞或降低Th17細胞對膽道閉鎖發病的影響。方法：套用免疫組化、流式細胞術、QRT-PCR、免疫螢光檢測患兒肝組織和外周血中Treg和Th17細胞的數量、相關細胞因子和轉錄因子表達水平，以及DC細胞TLR3、7、8的表達。體外細胞共培養實驗研究細胞功能及分化。套用RRV病毒建立BA動物模型，腹腔輸注Treg細胞或IL-6抗體，觀察小鼠BA發生率及生存率，並檢測Treg和Th17相關細胞因子和轉錄因子表達水平。結果：BA患兒組肝組織Treg和Th17細胞標誌物顯著高於對照組，P＜0.05。BA組血清中Treg和Th17細胞相關細胞因子顯著高於對照組，P＜0.05。外周血Th17/CD4+T比例顯著高於對照組，P＜0.05；而Treg/CD4+T細胞比例無差異。體外細胞培養發現升高的IL-6與免疫細胞特別是DC細胞高表達TLR3、7、8有關，並且促進Th17細胞偏移。小鼠BA模型內Treg，Th17相關因子檢測結果同人類相似，轉輸Treg細胞或IL-6抗體後，小鼠BA發生率顯著降低，21天生存率增加。結論：Treg及Th17細胞在膽道閉鎖的進行性炎症中發揮重要作用，通過增加Trge細胞數量，或通過IL-6抗體抑制Th17細胞分化，可以達到降低BA發病率、延長BA患兒生存時間的目的。
