調控Toll樣受體的新共生菌產物研究

《調控Toll樣受體的新共生菌產物研究》是依託南京大學，由譚仁祥擔任項目負責人的重大研究計畫。

基本介紹

• 中文名：調控Toll樣受體的新共生菌產物研究
• 項目類別：重大研究計畫
• 項目負責人：譚仁祥
• 依託單位：南京大學

項目摘要

Toll樣受體（TLR，1996年首次報導）及其通路調控是全球近10年最活躍的研究領域之一，對其進行深入研究可為一系列重大高發難治之症（如病毒感染、腫瘤、自身免疫性疾病）的控制帶來新希望。近五年來，申請者重點從宿主與共生菌之間的互惠共生和免疫妥協現象入手，採用多學科先進技術與方法，從多種宿主材料中分離共生菌，並發現了一系列對TLR有潛在調控作用的新免疫抑制分子。本項目擬：（1）集成化學修飾、分子生物學等技術，深入研究新骨架分子dalesconol A和B等對TLR通路的調控機制；（2）利用已有的平台和方法學體系繼續從其它宿主材料中獲取共生菌並快速發現其產生的可調控TLR的新分子，繼而深入研究其調控特點與機制。本項目既有望發現選擇性作用於TLR及有關通路的新探針分子及相關的新通路、新靶點，又有望發現新免疫調節藥物的先導化合物，還有望發現免疫妥協現象本質和規律，推動相關學科的發展。

結題摘要

Toll樣受體（Toll-like receptors，TLRs）及其通路調控是全球近十幾年來最活躍的研究領域之一。已有的報導已清楚地預示著：對TLR研究的深入可為一系列重大高發難治之症（如病毒感染、腫瘤、紅斑狼瘡等自身免疫疾病）的控制帶來新的希望。 1、進一步完善已有的共生菌培養和篩選系統，發現一系列骨架新穎的天然分子，並對活性分子進行半合成衍生化。 2、篩選對TLR信號通路具有調控作用的小分子化探針。針對不同的TLR（包括TLR2/6、TLR3、TLR4、TLR7/8、TLR9）建立快速有效的細胞篩選模型，選取新的活性小分子探針。 3、建立TLR相關動物疾病模型，考察小分子在疾病狀態下對免疫細胞表型及功能的調節，並綜合評價小分子的療效。建立膿毒症、急慢性腸炎、類風濕性關節炎和系統性紅斑狼瘡等小鼠模型，分析小分子在炎症或自身免疫性疾病中對巨噬細胞和樹突狀細胞的表型及功能的影響，並評價小分子的抗炎和免疫調節作用。 4、確定小分子探針調控相關TLR信號通路的新靶點及新機制。利用Microarray、分子對接、等溫滴定量熱法（ITC）和表面等離子共振（SPR）等技術綜合分析，尋找小分子探針的作用靶點。 5、建立TLR/NF-κB報告基因系統。針對抗病毒重要TLR通路，選擇TLR2、TLR3、TLR9建立了快速有效的細胞粗篩模型，利於小分子探針的初步篩選和抗病毒活性評價。 6、完善單純皰疹病毒以及手足口病毒評價體系。宿主細胞分別利用TLR3以及TLR2和TLR9識別手足口病毒和單純皰疹病毒，有關作用機理和機制相對清楚。利用這一特點，評價了小分子化合物在對抗病毒複製和感染誘導的炎症反應的作用機制。 7、鑑定TLR以及相關通路的蛋白作用分子。利用分子生物學結合細胞生物學和免疫學技術，鑑定感染以及抗感染反應中的重要接頭蛋白。利用免疫螢光和免疫共沉澱技術驗證這些分子在TLR通路活化和抗病毒反應中的重要性。