《調控SREBP-2促進脂質自噬對NAFLD中脂滴的作用及其機制》是依託華中科技大學，由徐可樹擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：調控SREBP-2促進脂質自噬對NAFLD中脂滴的作用及其機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：徐可樹
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的特徵性表現是肝細胞內過量的脂滴沉積，新近發現細胞自噬可以有效地吞噬細胞中的脂滴、降解脂質。研究顯示脂質代謝的關鍵因子固醇調節元件結合蛋白-2（SREBP-2）能激活腫瘤細胞中的自噬途徑，在肝細胞中是否也有同樣的作用目前未見報導，此外，SREBP-2在肝細胞中如何促進自噬，是通過單個抑或多個功能結構域來影響脂質自噬目前尚不明確。因此，本課題以SREBP-2做為切入點，通過採用NAFLD動物及細胞模型，結合基因敲除及酶學技術，明確SREBP-2蛋白與細胞自噬的內在聯繫，利用分子生物學方法調節肝細胞內SREBP-2蛋白片段的表達、增加自噬相關蛋白的分泌，達到促進脂質自噬的目的，為臨床診治NAFLD提供新的理論和實驗依據。
結題摘要
固醇調節元件結合蛋白-2（sterol regulatory element binging protein-2，SREBP-2）是脂質代謝中的一個重要轉錄因子，參與調控脂肪酸和膽固醇的合成。新近發現SREBP-2具有激活腫瘤細胞的自噬功能，在肝細胞中是否也有同樣的作用尚不清楚，尤其是發生了脂肪變的肝細胞能否通過自噬對過多沉積的脂質產生清除作用，目前也未見報導。鑒於此，本實驗研究了在肝細胞中SREBP-2與脂質自噬的關係，並探討在體外棕櫚酸鈉（sodium palmitate,PA）誘導的肝細胞脂肪變或在體內高脂飲食誘導的肝細胞脂肪變狀態下，能否通過調控SREBP-2來促進脂質自噬，達到降解肝細胞中脂滴沉積的目的。此外，SREBP-2在肝細胞中如何促進自噬，是通過單個抑或多個功能結構域來影響脂質自噬目前尚不明確。在與脂質代謝密切相關的非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）中，SREBP-2的表達異常活化，促進膽固醇異常積累。同時，研究表明過多的脂滴和膽固醇積累會使細胞自噬功能缺陷，且會導致內質網應激（endoplasmic reticulum stress, ERS）發生。然而，SREBP-2調節自噬和ERS的機制目前尚不明確。在本研究中，我們通過體內及體外實驗，用位點-1蛋白酶（Site 1 protease ,S1P）、位點-2蛋白酶（Site 2 protease ,S2P）特異性抑制劑和shRNA -S1P、shRNA -S2P抑制SREBP-2裂解活化，使PA誘導的人肝細胞和高脂飲食誘導的小鼠的肝細胞中受損的自噬流得以恢復，肝細胞內脂質沉積減少，ERS緩解。這些結果顯示通過自噬依賴途徑調節SREBP-2核轉位可減少肝細胞內脂滴沉積，緩解ERS。因此，本課題以SREBP-2做為切入點，通過採用NAFLD動物及細胞模型，基因過表達、基因沉默及酶學技術，明確SREBP-2蛋白與細胞自噬的內在聯繫，利用分子生物學方法調節肝細胞內SREBP-2蛋白片段的表達、增加自噬相關蛋白的分泌，達到促進脂質自噬的目的，為臨床診治NAFLD提供新的理論和實驗依據。
