《調控荷瘤小鼠MDSC增殖及分化的miRNA的篩選及鑑定》是依託復旦大學，由蔣京偉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：調控荷瘤小鼠MDSC增殖及分化的miRNA的篩選及鑑定
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：蔣京偉
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
髓系來源抑制性細胞（MDSC）實質為未分化的髓系造血細胞，大量存在於腫瘤機體中，它能通過多種途徑誘導腫瘤免疫耐受並促進腫瘤轉移。我們前期研究發現LLC荷瘤小鼠脾臟中有大量MDSC聚集，較正常小鼠中同類細胞分化明顯差。腫瘤機體中促使MDSC大量增殖並阻止其分化的基因調控機制尚不清楚；研究發現miRNA在調控髓系造血細胞增殖及分化中具有重要作用。因此，MDSC的增殖及分化亦應受miRNA的調控。本項目將MDSC分為G-MDSC及M-MDSC兩大亞群作為研究對象，通過基因晶片技術比較篩選荷瘤小鼠與正常小鼠脾臟MDSC中差異表達的候選miRNA，構建表達載體，轉染MDSC及其前體細胞，使其過表達候選miRNA；S17基質細胞體外培養及骨髓移植實驗鑑定候選miRNA對MDSC增殖及分化的影響。生物信息學及雙螢光素酶實驗預測並鑑定目標miRNA的靶基因。研究結果將部分揭示調控MDSC增殖和分化的機制。
結題摘要
髓系來源抑制性細胞（MDSC）實質為未分化的髓系造血細胞，大量存在於腫瘤機體中，它能通過多種途徑誘導腫瘤免疫耐受並促進腫瘤轉移。MicroRNAs具有調控骨髓造血細胞增殖與分化的作用。故MDSCs的增殖與分化很可能受microRNAs調控，篩選出調控MDSCs增殖與分化的microRNA及其靶基因有助於開發調控MDSCs增殖與分化的靶向藥物。我們研究發現LLC肺癌荷瘤小鼠脾臟中有大量MDSC 聚集，其中G-MDSCs及M-MDSCs的比例均是正常小鼠的6倍，且荷瘤小鼠脾臟比正常小鼠脾臟明顯增大。鑒於G-MDSCs及M-MDSCs具有一些不同的生物學特性，其microRNA表達譜亦可能不同。我們將LLC荷瘤小鼠的G-MDSCs及M-MDSCs亞群分開行microRNA晶片檢測。與正常小鼠的G-MDSCs及M-MDSCs相比，兩亞群具有不同的microRNA表達譜。我們用生物信息學預測可能調控G-MDSCs及M-MDSCs增殖與分化的microRNA及其靶基因。並且在LLC荷瘤小鼠及B16黑色素瘤小鼠G-MDSCs及M-MDSCs中用qRT-PCR進行驗證，發現miR-350及其靶基因IL10可能參與腫瘤誘導的G-MDSCs的增殖與分化，而miR-486及其靶基因Cebpa可能參與腫瘤誘導的M-MDSCs的增殖與分化，我們已經構建了表達miR-350及miR-486的慢病毒表達載體，其功能驗證正在進行。此外，我們還發現，miR-192在腫瘤誘導的G-MDSCs及M-MDSCs中均高表達，其在調控MDSCs中的作用及機制有待進一步研究。
