裸花紫珠提取物及其製備方法和套用:專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,改善效果

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》是九芝堂股份有限公司於2011年7月19日申請的專利，該專利的公布號為CN102258637A，申請號為2011102009736，授權公布日為2011年11月30日，發明人是袁莉、黃勝、谷陟欣、周芳、盧捷。

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》提供了一種裸花紫珠提取物、製備方法及其套用，具體提供了一種裸花紫珠提取物和製備方法，以及該提取物在製備抑菌、止血、鎮痛、收斂的藥物的套用，同時還提供以該提取物為在口腔清潔產品中的套用。

2018年12月20日，《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》獲得第二十屆中國專利優秀獎。

基本介紹

中文名：裸花紫珠提取物及其製備方法和套用
公告號：CN102258637A
授權日：2011年11月30日
申請號：2011102009736
申請日：2011年7月19日
申請人：九芝堂股份有限公司
地址：湖南省長沙市開福區芙蓉中路一段129號
發明人：袁莉、黃勝、谷陟欣、周芳、盧捷
Int.Cl.：A61K36/86(2006.01)I; A61K8/97(2006.01)I; A61Q11/00(2006.01)I
類別：發明專利

專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,改善效果,技術領域,權利要求,實施方式,榮譽表彰,

專利背景

裸花紫珠（CallicarpanudifloraHook.exArn.）為馬鞭草科（Verbenaceae）紫珠屬植物，主產於中國海南，是一種海南地道藥材，中國廣東、廣西也有分布。中國國外主要分布於印度、越南和馬來西亞。其根、葉可入藥，有抗菌止血，消炎解毒，散瘀消腫，驅風祛濕等功效，主治化膿性炎症、急性傳染性肝炎、呼吸道及消化道出血、創傷出血等症，外用治燒、燙傷及外傷出血等。

截至2011年7月19日，裸花紫珠近年來廣泛套用於醫藥、化妝品等領域中，如：

CN200910142774.7，該發明提供了一種《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》提供了一種有抗菌、抗炎及止血作用的黎藥裸花紫珠提取物及其製備方法以及含有該活性提取物的藥物組合物。用它可以製備成用來治療細菌感染引起的炎症，急性傳染性肝炎，子宮、陰道、呼吸道及消化道等腔道出血的口服製劑。

JP20060035045，該發明提供一種含有裸花紫珠提取物的抗老化劑、減肥製劑和化妝品。

截至2011年7月19日，有的裸花紫珠提取工藝主要為水提或者有機溶劑提取，且一般使用的原料為裸花紫珠採收後乾燥的原料。但發明人發現裸花紫珠乾品的有效成分含量不高，影響提取物及下游終端產品的有效成分含量和組成，進而影響其作用效果。

因此，《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》所要解決的技術問題在於對裸花紫珠的工藝進行進一步的深入研究，從而提供一種活性成分含量更高，更有效的裸花紫珠提取物及其以及以該提取物在製備抑菌、止血、鎮痛、收斂等作用的藥物的套用，同時還提供以該提取物在口腔清潔產品中的套用。

發明內容

專利目的

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》的第一個目的是提供一種裸花紫珠提取物，該提取物以裸花紫珠鮮藥材為原料，新鮮原料經提取，濃縮得到裸花紫珠提取物。

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》的第二個目的是提供上述提取物在製備抑菌、止血、鎮痛、收斂的藥物的套用。

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》的第三個目的是提供上述提取物在製備牙膏、口膠、漱口水、口香噴霧劑、含片等口腔清潔用品中的套用，由裸花紫珠提取物與常規原料按常規工藝製成，裸花紫珠提取物為上述口腔清潔用品重量的1-20%。

技術方案

裸花紫珠提取物的原料採用新鮮狀態的裸花紫珠地上部分，優選夏季和秋季的裸花紫珠葉和/或嫩枝。

所述的提取物的製備方法包括以下幾種：

方法一：採用裸花紫珠新鮮原料，加入水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液濾過，濾液濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

方法二：採用裸花紫珠新鮮原料，加入水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用10％～90％的乙醇洗脫，洗脫液濾過，濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

方法三：新鮮狀態的裸花紫珠原料，經壓榨得到壓榨液及壓榨渣，壓榨液濾過，濾液濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

方法四：新鮮狀態的裸花紫珠原料，經壓榨得到壓榨液及壓榨渣，壓榨渣加水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液濾過，濾液濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

方法五：新鮮狀態的裸花紫珠原料，經壓榨得到壓榨液及壓榨渣，壓榨液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用10％～90％的乙醇洗脫，洗脫液濾過，濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

方法六，新鮮狀態的裸花紫珠原料，經壓榨得到壓榨液及壓榨渣，壓榨渣加水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用10％～90％的乙醇洗脫，脫液濾過，濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

方法七：新鮮狀態的裸花紫珠原料，經壓榨得到壓榨液及壓榨渣，壓榨渣加水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液和壓榨液合併，濾過，濾液濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

方法八：新鮮狀態的裸花紫珠原料，經壓榨得到壓榨液及壓榨渣，壓榨渣加水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液和壓榨液合併，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用10％～90％的乙醇洗脫，洗脫液濾過，濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

方法三至八中所述的壓榨是採用重量比為1~3：1的水或稀醇或稀酮與新鮮裸花紫珠混合。

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》實現了最大程度地從裸花紫珠中提取有效活性成分，發明人對裸花紫珠的提取方式（榨取、加熱）、採收時間（春季、夏季、秋季、冬季）和不同乾燥狀態（新鮮、乾品）進行了系統研究，結果如下表：

表1

注意：以上指標均按鮮品計。

在常規的提取工藝中，一般所用的為曬乾的裸花紫珠，研究結果說明裸花紫珠的提取得率、總黃酮和木犀草素、總鞣質含量與採收季節、提取方式和藥材幹燥狀態有關。

1）新鮮的狀態的裸花紫珠加熱提取的提取得率、總黃酮和木犀草素、總鞣質含量均比相同時期的乾品高。以秋季採收的裸花紫珠為例，新鮮裸花紫珠中的提取得率、總黃酮含量、木犀草素、總鞣質含量分別是乾品的1.20、1.59、1.52、1.05倍，說明原料在乾燥過程中有效成分的喪失了大部分。

2）與加熱提取相比，榨取明顯提高了裸花紫珠的得率、總黃酮和木犀草素、總鞣質含量。以秋季採收的裸花紫珠為例，新鮮裸花紫珠榨取的得率、總黃酮含量、木犀草素、總鞣質含量分別是乾品的1.13、1.23、1.20、1.14倍。

3）不同採收季節的裸花紫珠的得率、總黃酮和木犀草素含量有一定差異，研究表明夏季和秋季時期的提取得率、總黃酮和木犀草素含量優於春季和冬季。

改善效果

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》具有如下優點和技術效果：

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》以裸花紫珠鮮藥材為原料，其活性成分總黃酮和木犀草素、總鞣質含量較乾品高，提取率大大提高，有利於節約成本，提高資源利用率。另一方面直接以裸花紫珠鮮品為原料，減少有效物質的損失，有利於提高有效物質成分群的作用，提高產品的作用效果。

技術領域

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》涉及指裸花紫珠提取物及其製備方法和用途，更具體的說，裸花紫珠提取物在製備抑菌、止血、鎮痛、收斂的藥物的套用以及在製備牙膏、口膠、漱口水、口香噴霧劑、含片等口腔清潔用品中的套用。

權利要求

1.一種裸花紫珠提取物，其特徵在於其原料採用新鮮狀態的裸花紫珠地上部分，所述裸花紫珠提取物通過以下方法中任一一種方法製備：（1）採用裸花紫珠新鮮原料，加入水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液濾過，濾液濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物；（2）採用裸花紫珠新鮮原料，加入水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用10％～90％的乙醇洗脫，洗脫液濾過，濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物；（3）採用新鮮狀態的裸花紫珠原料，經壓榨得到壓榨液及壓榨渣，壓榨液濾過，濾液濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

2.根據權利要求1所述的裸花紫珠提取物，其特徵在於其原料採用新鮮狀態的裸花紫珠的葉和/或嫩枝。

3.根據權利要求1或2所述的提取物，其特徵在於，方法（3）中所述的壓榨渣加水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液濾過，濾液濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

4.根據權利要求1或2所述的提取物，其特徵在於方法（3）中所述的壓榨液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用10％～90％的乙醇洗脫，洗脫液濾過，濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

5.根據權利要求3所述的提取物，其特徵在於所述的濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用10％～90％的乙醇洗脫，洗脫液濾過，濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

6.根據權利要求1或2所述的提取物，其特徵在於：方法（3）中新鮮狀態的裸花紫珠原料，經壓榨得到壓榨液及壓榨渣，壓榨渣加水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液和壓榨液合併，濾過，濾液濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

7.根據權利要求1或2所述的提取物，其特徵在於：方法（3）中新鮮狀態的裸花紫珠原料，經壓榨得到壓榨液及壓榨渣，壓榨渣加水或稀醇溶劑，加熱提取，提取液和壓榨液合併，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用10％～90％的乙醇洗脫，洗脫液濾過，濃縮，乾燥得裸花紫珠提取物。

8.根據權利要求1或2所述的提取物，其特徵在於，方法（3）中所述的壓榨是採用重量比為1～3：1的水或稀醇與新鮮裸花紫珠混合。

9.權利要求1或2所述的提取物在製備抑菌、止血、鎮痛、收斂的藥物的套用。10.權利要求1或2所述的提取物在製備牙膏、口膠、漱口水、口香噴霧劑、含片等口腔清潔用品中的套用，裸花紫珠提取物為上述口腔清潔用品重量的1-20%。

實施方式

實施例一

取8月採收的新鮮裸花紫珠葉1千克，加熱提取兩次，每次加水8千克，提取2小時，合併濾液，濾過，濃縮，乾燥得90.6克提取物，裸花紫珠提取得率為9.06%，測得總黃酮含量為48.2毫克/克，木犀草素含量為0.65毫克/克，總鞣質含量15.61%（按新鮮藥材計）。

實施例二

取8月採收的新鮮裸花紫珠葉和嫩枝各0.5千克，加熱提取兩次，每次加水8千克，提取2小時，合併濾液，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用80％的乙醇洗脫，脫液濾過，濃縮，乾燥得74.3克提取物，裸花紫珠提取得率為7.43%，測得總黃酮含量為53.1毫克/克，木犀草素含量為0.50毫克/克（按新鮮藥材計）。

實施例三

取10月採收的新鮮裸花紫珠葉1千克，加2千克水破碎成勻漿，壓榨，濾過，濃縮，乾燥得109.3克提取物，裸花紫珠提取得率為10.93%，測得總黃酮含量為59.4毫克/克，木犀草素含量為0.75毫克/克，總鞣質含量17.95%（按新鮮藥材計）。

實施例四

取10月採收的新鮮裸花紫珠葉1千克，加2千克水破碎成勻漿，壓榨，壓榨渣加3千克水加熱提取，提取液濾過，濃縮，乾燥得12.1克提取物，裸花紫珠提取得率為1.21%，測得總黃酮含量為10.2毫克/克，木犀草素含量為0.06毫克/克，總鞣質含量2.11%（按新鮮藥材計）。

實施例五

取8月採收的新鮮裸花紫珠葉1千克，加2千克水破碎成勻漿，壓榨，壓榨液濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用70%的乙醇洗脫，脫液濾過，濃縮，乾燥得83.4克提取物，裸花紫珠提取得率為8.34%，測得總黃酮含量為58.6毫克/克，木犀草素含量為0.75毫克/克（按新鮮藥材計）。

實施例六

取8月採收的新鮮裸花紫珠葉1千克，加2千克水破碎成勻漿，壓榨，壓榨渣加3千克水加熱提取，提取液濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用70%的乙醇洗脫，脫液濾過，濃縮，乾燥得9.5克提取物，裸花紫珠提取得率為0.95%，測得總黃酮含量為8.7毫克/克，木犀草素含量為0.04毫克/克（按新鮮藥材計）。

實施例七

取10月採收的新鮮裸花紫珠葉1千克，加2千克水破碎成勻漿，壓榨，壓榨渣加3千克水加熱提取，提取液和壓榨液合併，濾過，濃縮，乾燥得122.1克提取物，裸花紫珠提取得率為12.21%，測得總黃酮含量為64.7毫克/克，木犀草素含量為0.82毫克/克，總鞣質含量19.22%（按新鮮藥材計）。

實施例八

取8月採收的新鮮裸花紫珠葉1千克，加2千克水破碎成勻漿，壓榨，壓榨渣加3千克水加熱提取，提取液和壓榨液合併，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱層析，用水洗滌柱體，棄去水洗液，再用70%的乙醇洗脫，脫液濾過，濃縮，乾燥得94.2克提取物，裸花紫珠提取得率為9.42%，測得總黃酮含量為67.4毫克/克，木犀草素含量為0.79毫克/克（按新鮮藥材計）。

實施例九

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》裸花紫珠提取物的有關藥效試驗如下：

1、抑菌作用：通過體外抑菌實驗，以最低抑菌濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MBC）指標評價《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》製備的裸花紫珠提取物對常見菌株的抗菌作用。菌液製備：挑取斜面菌種接種於20%牛浸汁培養基中，37℃培養過夜，再用20%牛浸汁培養基將菌液稀釋至10細菌群落總數每毫升，立即接種。MIC測定：採用液體試管連續稀釋法，用20%牛浸汁培養基將樣品作連續對倍稀釋。將1.0毫升加入滅菌試管中，每管加入0.05毫升標準新鮮菌液，並設菌株對照及溶媒對照組，37℃培養18～24小時，觀察細菌生長情況，以無菌生長的最高稀釋度為MIC。MBC測定：採用平板劃線接種法，從被判為MIC及MIC相鄰兩管的培養基中挑取培養液接種至10%血清MH肉湯瓊脂平板上，37℃培養18～24小時，以生長菌落數≤5個的最高稀釋度為MBC。試驗結果見表一。

表一裸花紫珠提取物體外抗菌試驗結果

表1

《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》製備的裸花紫珠提取物與裸花紫珠乾藥材提取物均具有對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、肺炎球菌、綠膿桿菌、乙型鏈球菌、丙型鏈球菌和幽門螺旋桿菌均有不同程度的抑制和殺滅作用，但《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》製備的裸花紫珠提取物效果更好。

用《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》製備的裸花紫珠提取物300、600毫克/千克2個劑量組，空白對照組，裸花紫珠乾藥材提取物組，雲南白藥組。將50隻健康昆明小白鼠隨機分5組（每組10隻，雌雄各半）。連續給藥7天，最後一天給藥45min後，用剪尾法測定小鼠出血時間（BT），用毛細玻管法測凝血時間（CT），評價藥物止血效果。血液放出後測定凝血酶時間（TT）、凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、纖維蛋白原（FIB）含量。

實驗數據見下表二和三。

表二《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》裸花紫珠提取物對小鼠止血作用的試驗結果

（均數±標準差，N=10）

表2

*P<0.05，**P<0.01與空白對照組比較。

表三《裸花紫珠提取物及其製備方法和套用》裸花紫珠提取物對小鼠止血作用的試驗結果