血型物質檢測

用品及準備

5%A、B、O和Le(a+b-)紅細胞懸液，與待檢者相同，標化的抗A、抗B、抗H、抗Lea血清，已知的分泌型和非分泌型唾液，其A、B、O型與待檢者相同。燒杯或粗口試管、煮鍋等，其他材料同ABO血型鑑定。

方法及內容

唾液的留取

①將自然流出的唾液5—10ml盛入乾燥清潔的容器(小燒杯、三角瓶或粗口試管等)內，在水浴中煮沸10min(以滅活能使血型物質不活化的唾液酶，同時也破壞常見存在於唾液中的抗A及抗B)。②以3000r/min離心10min，留取上清液備用，棄去不透明的半固態物質。

試劑血清修正液的製備

①取小試管分成4排，每排5支，分別標明第1排A1～A5，第2排B1～B5，第3排H1～H5，第4排Lea1～Lea5。②各排從第2管開始，每管加生理鹽水0.1ml。③第1—4排的第1和第2管分別加抗A、抗B、抗H及抗Lea血清0.1ml，從第2管開始倍量稀釋。④於第1排各管加2%-5%的A型紅細胞鹽水懸液0.1ml；第2排各管加2%-5%的B型紅細胞鹽水懸液0.1ml；第3排各管加2%-5%的O型紅細胞鹽水懸液0.1ml；第4排各管加2%-5%的Le(a+b-)型紅細胞鹽水懸液0.1ml。⑤振搖試管架使之混勻，置室溫lh後觀察結果。每排以出現"4+”凝集的最高稀釋度為最適稀釋度。

唾液中血型物質的檢測

(1)準備唾液做陽性或陰性對照。對ABH分泌者，使用已知Se(分泌型)和sese(非分泌型)人的唾液。對Lewis分泌者，使用Lea陽性和Lea陰性人的唾液。可以用對紅細胞試驗的結果來選擇這些對照。陽性對照應該有Le(a+b-)的紅細胞，陰性對照應該有Le(a-b-)的紅細胞。試劑對照用生理鹽水。

(2)取4支試管，對ABH試驗分別標明待檢者、分泌型、非分泌型和生理鹽水。對Lewis試驗分別標明待檢者、Lewis陽性、Lewis陰性和生理鹽水。

(3)按標記分別加入最適稀釋度抗血清1滴。

(4)在相應的試管中加入唾液1滴，在對照管中加入生理鹽水1滴。

(5)混合後在室溫孵育30min，中和抗體。

(6)每管中加入5%已洗滌並與抗體相對應的紅細胞懸液1滴。

(7)混合後置室溫孵育1h或15min後，以3000r/min離心15s，觀察結果。

結果判讀：先看對照，分泌型對照應不凝集，非分泌型應凝集。待檢者若不凝集為分泌型，凝集為非分泌型。Lewis試驗，先看對照，陽性對照應不凝集，陰性對照凝集。待檢者不凝集為陽性，凝集者為Lea陰性。

血型物質效價測定

(1)取小試管10支，依次編號。第2～10管各加入生理鹽水0.1ml。

(2)第1、2管各加入待檢者唾液0.1ml，從第2管開始倍比稀釋，第10管為對照管。

(3)每管加相應的經修正過的試劑血清(待檢者為A型，則用抗A；B型用抗B；O型用抗H；AB型用抗A和抗B；Lea+用抗Lea0.1ml，混勻後，置室溫(20℃)30min。