《蛋白4.1R對B細胞活化及BCR介導的信號轉導調控機制》是依託鄭州大學，由康巧珍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：蛋白4.1R對B細胞活化及BCR介導的信號轉導調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：康巧珍
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
B細胞活化在機體適應性免疫，特別是抗感染和B細胞相關自身免疫疾病中發揮重要作用，然而參與B細胞活化調控的分子及作用機制還未被完全了解。4.1R最初是在紅細胞中發現的細胞膜骨架蛋白接頭分子，也是新發現的T細胞活化調控因子。我們在前期研究中發現4.1R基因敲除顯著增強小鼠抗體產生和B細胞活化增殖能力，但4.1R參與B細胞活化調控的機制國內外均未見報導。本項目擬利用蛋白4.1R基因敲除小鼠和4.1R表達缺失的B細胞模型，研究4.1R在B細胞活化及小鼠關節炎疾病模型中的免疫生理效應；並探討4.1R基因缺失對BCR介導的信號通路的影響，以期闡明4.1R調控B細胞活化可能的分子機制，為證實細胞膜骨架蛋白4.1R是又一新發現的B細胞活化及信號轉導負調控分子提供實驗依據。
結題摘要
細胞膜骨架蛋白4.1R在小鼠成熟B細胞中高表達，但功能未知。項目利用4.1R表達缺失C57BL/6J-4.1R-/-小鼠脾臟來源成熟B細胞，從分子和細胞水平研究了蛋白4.1R在B細胞活化及信號轉導中的生物學功能。通過比較4.1R+/+和4.1R-/- B細胞在不同抗原（LPS、anti-IgM）刺激下，B細胞活化、增殖及抗體類型轉換等表型的差異， 結果表明，在LPS刺激下，4.1R表達缺失會導致B細胞活化、增殖和抗體轉換能力增強，但其抗體分泌水平降低，提示蛋白4.1R對活化後的B細胞命運具有調控作用，免疫螢光和免疫共沉澱實驗結果表明，蛋白4.1R通過B細胞膜上的TLR4受體調控LPS誘導的B細胞活化。在anti-IgM的刺激下，4.1R基因敲除 B細胞活化、增殖和抗體分泌水平增強，進一步利用蛋白磷酸化組學及生物信息學技術研究發現蛋白4.1R調控BCR介導的信號轉導是通過抑制BCR下游AKT磷酸化水平實現的。免疫螢光和免疫共沉澱實驗結果證實4.1R發揮調控功能是通過與CD19及BLNK形成蛋白複合體而抑制BLNK的磷酸化，從而調控BCR介導的信號轉導。利用GEO資料庫比較健康人和類風濕性關節炎患者的蛋白4.1R表達差異，發現4.1R表達缺失與B細胞異常活化疾病易感性密切相關。研究結果表明蛋白4.1R通過膜受體介導的細胞信號轉導調控B細胞活化及增殖，是又一新發現的內源性B細胞活化負調控因子。
