蛋白質非酶糖化

蛋白質非酶糖化蛋白質非酶糖化，機體組織過多的中藥蛋白質非酶糖化可能導致功能障礙。

基本介紹

• 中文名：蛋白質非酶糖化
• 表示方式：D-(6-3H)葡萄糖與蛋白質放射量
• 影響：過多可能導致功能障礙
• 意義：糖尿病醫學上的探索

材料與方法

1.1材料D-(6-3H)葡萄糖50Ci/mmol，北京同位素公司；人血清白蛋白(HSA)，Sigma產品；牛血清白蛋白(BSA)，Sigma產品：閃爍液Clear-soll購於NacalaiTesqueInc;TritonX-100,武漢中建科技發展有限公司；氨基胍，Sigma產品。

1.2儀器LKB-1219液體閃爍儀：LDZ5-2高速離心機。

1.3方法[1]HAS糖化分三組進行。空白對照組：含D-（6-3H）葡萄糖5nmol/L、HSA7mg/ml、PBS0.2mol/L(pH7.4)；給藥組與陽性藥物組另加受試藥物或氨基胍，總反應體系為1ml。於37℃保溫8天，每天取樣100μl，加入BSA(10mg/ml)50μl，然後加入1ml預冷10%三氯醋酸沉澱蛋白，2500r/min離心10分鐘，傾去上清液，用10%三氯醋酸洗沉澱兩次，最後溶於水溶液，測定D-(6-3H)葡萄糖與蛋白質結合的放射量(cpm)表示。

結果

蛋白質非酶糖化用D-(6-3H)葡萄糖與蛋白質結合的放射量(cpm)表示。其反應過程如圖1所示，HSA在一定濃度的葡萄糖存在下保溫8天后出現了明顯的糖基化反應。第1、2天結合速度很快，以後逐漸減慢，第6天后趨於平穩。

討論

在高糖環境下，機體組織的許多重要蛋白質的非酶糖化反應增強，導致功能障礙，這是造成糖尿病晚期併發症的主要原因。本次實驗結果也證實，葡萄糖與HSA在體外經一段時間的保溫後發生了非酶糖基化反應。葛根素、銀杏黃酮均為黃酮類化合物，其抑制蛋白質糖基化的機制可能是選擇性阻斷AGEs前體物質的生成；也可能是阻斷葡萄糖衍生物能進一步與其化蛋白質交聯。

中醫藥在治療糖尿病及其晚期併發症方面有著悠久的歷史，而這些治療作用可能與其具有抑制蛋白質非酶糖化作用相關，這對有關藥物有效組分的進一步研究有著重要意義。