蛋白質陣列文庫

蛋白質陣列文庫是將不同的具有生物活性的蛋白質分別置於微量板的不同孔內來進行蛋白質功能篩選的文庫。

簡介

它實質上是cDNA陣列文庫的繼續。

製作

構建蛋白質陣列文庫的第一步是建立全長cDNA表達文庫，再將cDNA文庫轉化成蛋白質文庫。原則上所有cDNA都可以用於蛋白質文庫的構建，然而大多數蛋白質因不具備體外可檢測的生物活性，因而不適於文庫篩選。目前能適用於體外高通量功能篩選的蛋白質主要有細胞膜“表面蛋白”和“分泌型蛋白”。大部分分泌型蛋白質在氨基末端含有20至40個胺基酸的信號肽。而膜蛋白均含有跨膜疏水性的α螺旋結構。利用電腦程式可以預測這兩類蛋白，從而挑選相應的cDNA構建蛋白質陣列文庫。一旦cDNA文庫確定後，可將cDNA克隆到表達標記蛋白的載體內，套用高通量自動化的蛋白表達系統來表達和純化帶有標記的靶蛋白。

比較

和cDNA文庫相比，蛋白質文庫穩定性差，因為蛋白質易降解和沉澱。為了保證蛋白質的活性通常需要新鮮製備用於篩選的蛋白質。