《蛋白激酶MAP3K8激活後降解的生化機制》是依託浙江大學，由夏總平擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：蛋白激酶MAP3K8激活後降解的生化機制
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：夏總平
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶MAPKKK家族成員MAP3K8在參與固有免疫和炎症反應的細胞如巨嗜細胞以及甲狀腺癌、乳腺癌中表達，介導TNFR,IL1R和Toll-like Receptor(TLR)等信號通路中MEK1/2-ERK1/2的激活，從而調節促炎症因子特別是TNFa的表達。當這些信號通路激活後，MAP3K8首先被激活然後被快速降解。然而，在這些信號通路中MAP3K8的激活以及激活後降解的生化機制知之甚少、有待深入研究。我們在體外無細胞系統中重建了MAP3K8的激活和降解過程。利用該系統，在上一個國家自然科學基金項目（在研）中，通過經典液相色譜蛋白分離技術，我們分離、純化和鑑定了MAP3K8激活所必需的分子和條件，探討了其激活的生化機制。作為延續，在本申請中，我們擬利用該系統和現有的優勢和積累的材料來深入研究MAP3K8激活後被調控性降解的機制。
結題摘要
絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶MAPKKK家族的MAP3K8在參與固有免疫和炎症反應的細胞比如巨嗜細胞以及甲狀腺癌以及乳腺癌中表達，介導TNFR,IL1R以及Toll-like Receptor(TLR)等信號通路中MEK1/2-ERK1/2的激活，從而調節促炎症因子（pro-inflammatory cytokines）特別是TNF的表達。當這些信號通路激活後，MAP3K8首先被激活然後被快速降解。發生類似行為的蛋白激酶是不多的。然而，在這些信號通路中MAP3K8的激活以及激活後快速降解的生化機制還有待深入研究。圍繞MAP3K8，本課題擬回答如下關鍵問題：（1）介導 MAP3K8 誘導性降解的轉譯後修飾形式和位點以及泛素化位點的鑑定；（2）介導 MAP3K8 泛素化的泛素連線酶 SCF 複合體的鑑定；（3）MAP3K8 激活後快速降解的生理和病理意義。我們的研究結果表明：（a）MAP3K8在激活過程中，它的Ser60、Ser62、Ser66、Ser141、Tyr153、Ser413、Ser443發生了高度磷酸化；（b）基於Cul1的SCF泛素連線酶複合物介導了MAP3K8的降解，而F-box蛋白FBXO3是識別磷酸化後的MAP3K8的接頭蛋白。另外，通過小分子抑制劑文庫的篩選，我們得到了6個MAP3K8的抑制劑，這些可以作為潛在的先導藥物，進行進一步的改造，用以提高其特異性抑制活性。我們的研究鑑定了介導MAP3K8激活後發生降解的泛素連線酶，加深了對MAP3K8功能調控、以及其生理病理意義的了解。在該課題資助下，我們已經發表了3篇高水平論文，在國際國內學術會議上報告5次。
