藏雞與低地雞胚胎NADH脫氫酶功能差異的分子機理研究

《藏雞與低地雞胚胎NADH脫氫酶功能差異的分子機理研究》是依託中國農業大學，由鮑海港擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：藏雞與低地雞胚胎NADH脫氫酶功能差異的分子機理研究
• 依託單位：中國農業大學
• 項目負責人：鮑海港
• 項目類別：面上項目

項目摘要

藏雞對高原低氧環境具有可穩定遺傳的適應能力。低氧條件下，較高的線粒體呼吸功能是機體低氧適應的有效途徑。前期研究表明，NADH脫氫酶對提高低氧孵化的藏雞胚胎線粒體呼吸功能有重要作用。本申請項目擬用Clark氧電極法測定雞胚的線粒體呼吸功能及NADH脫氫酶活性；用螢光染料（Pro-Q-Diamond/SYPRO）染色定量法、雙向凝膠電泳和生物質譜等技術方法分析藏雞和低地雞胚胎NADH脫氫酶的亞基表達和磷酸化差異；用基因轉染技術、反義核酸技術和酶聯免疫吸附測定等方法驗證影響NADH脫氫酶功能的關鍵亞基；用分子生物學和生物信息學技術獲得編碼關鍵亞基基因的核苷酸序列，檢測基因多態性，分析預測基因突變對基因表達水平和磷酸化位點的影響並加以驗證，以期揭示NADH脫氫酶改善藏雞胚胎線粒體呼吸功能的分子機理。所獲結果可以揭示藏雞胚胎線粒體低氧適應的重要分子遺傳學基礎，為培育高原優質高產雞品種提供理論指導。

結題摘要

本項目的研究目標是利用轉錄組測序技術分析藏雞胚胎和低地雞胚胎在轉錄組上的差異，篩選與NADH脫氫酶功能有重要關係的差異基因（關鍵基因），並揭示藏雞胚胎通過關鍵基因改善NADH脫氫酶功能的分子遺傳學機理。總體來講，本研究是按照研究計畫進行的，然而，研究結果與預期並不一致。我們利用轉錄組測序技術分析了藏雞胚胎和低地雞胚胎在轉錄組上的差異，但未能篩選到與NADH脫氫酶功能有重要關係的差異基因（關鍵基因），甚至沒有發現與線粒體電子傳遞相關的差異基因，所以我們未就NADH脫氫酶在低氧適應中的作用展開研究。儘管沒有發現預期的差異基因，但是我們找到了一些與急性時相反應、脂肪代謝和機體抗氧化系統相關的一些差異基因，並進行了功能注釋。以上的研究結果表明急性時相反應、脂肪代謝和抗氧化能力的差異可能是藏雞胚胎低氧適應的主要原因，而以前發現的藏雞胚胎較強的線粒體呼吸功能只是低氧適應的重要表現。由於本項資助時間較短強度低，我們未能對這些差異基因進行功能驗證。