《薑黃素抑制腸道膽固醇吸收的作用及機制研究》是依託中山大學，由馮丹擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：薑黃素抑制腸道膽固醇吸收的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：馮丹
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
高膽固醇血症是心血管疾病的重要危險因素，有研究報導薑黃素具有顯著的降膽固醇作用，但其分子機制尚未明確。腸道膽固醇吸收在調控血漿膽固醇水平中起重要作用，我們前期研究發現薑黃素可明顯抑制Caco-2腸上皮細胞膽固醇吸收和膽固醇吸收關鍵蛋白NPC1L1的表達。為進一步闡明薑黃素對腸道膽固醇吸收的影響及其機制，本研究擬在Caco-2細胞模型中觀察薑黃素對NPC1L1轉錄活性的影響，並採用siRNA技術和構建核受體表達質粒及報告基因質粒，探討薑黃素是通過LXRα、PPARα和HNF4α哪條核受體信號途徑來調控NPC1L1轉錄和表達進而抑制膽固醇吸收的。然後，採用高膽固醇血症倉鼠模型和人群干預研究，驗證薑黃素具有抑制體內腸道膽固醇吸收的作用，其機制涉及核受體-NPC1L1通路，並且明確薑黃素抑制腸道膽固醇吸收與其降膽固醇的關係。本研究將為薑黃素降膽固醇的臨床套用以及營養膳食防治高膽固醇血症奠定基礎。
結題摘要
高膽固醇血症是心血管疾病的重要危險因素，腸道膽固醇吸收在調控血漿膽固醇水平中起重要作用，膽固醇吸收關鍵轉運蛋白NPC1L1成為目前降膽固醇和防治高膽固醇血症的新靶點。薑黃素具有顯著的降膽固醇作用，但薑黃素對NPC1L1轉錄、表達和腸道膽固醇吸收的影響尚不清楚。因此本項目探討薑黃素對腸道膽固醇吸收的影響及機制。本研究主要採用Caco-2腸上皮細胞和高膽固醇血症倉鼠模型進行了實驗。通過培養單層極化Caco-2細胞，觀察薑黃素對NPC1L1轉錄活性的影響，採用小分子RNA干擾（siRNA）技術和構建SREBP-2表達質粒及報告基因質粒，觀察薑黃素對SREBP-2激活的影響以及分析SREBP-2在薑黃素抑制膽固醇吸收中的作用。然後，採用高膽固醇血症倉鼠模型進行薑黃素干預實驗，觀察薑黃素在體內是否同樣可以抑制腸道膽固醇吸收，該抑制作用與調控SREBP-2-NPC1L1膽固醇吸收通路有關，並且明確薑黃素抑制腸道膽固醇吸收與其降膽固醇的關係。在此基礎上，我們還進行了其它膳食因素對腸道膽固醇吸收影響以及補充薑黃素對動脈粥樣硬化防治作用的擴展研究。在培養的單層Caco-2細胞中，我們發現不同濃度薑黃素能夠呈濃度依賴性地抑制Caco-2細胞NPC1L1轉錄活性和SREBP-2 mRNA表達；採用脂質體轉染法分別將SREBP-2表達質粒和報告基因質粒共轉染Caco-2細胞後，再加入薑黃素處理，報告基因檢測結果顯示薑黃素可顯著抑制Caco-2細胞SREBP-2激活。利用siRNA技術沉默掉Caco-2細胞SREBP-2後，薑黃素對Caco-2 細胞膽固醇吸收和NPC1L1轉錄活性不再具有抑制作用。高脂高膽固醇餵飼的倉鼠給予薑黃素干預12周后，薑黃素補充能夠顯著降低倉鼠血清TC、TG 和 LDL-C水平以及肝臟 TC 和 TG 水平，促進糞便膽固醇排除，下調小腸組織SREBP-2 和 NPC1L1 mRNA 和蛋白表達，但對小腸ABCG5/ABCG8 mRNA表達無明顯影響。這些研究結果表明薑黃素可通過抑制SREBP-2信號通路來下調NPC1L1的轉錄和表達，進而抑制腸道膽固醇吸收；抑制腸道膽固醇吸收是薑黃素降膽固醇的一個重要作用機制。本項目研究將為薑黃素降膽固醇的臨床套用以及營養膳食防治高膽固醇血症奠定基礎。
