大量研究表明,海藻的主要成分——硫酸多糖具有抗病毒、抗凝血、降血脂、抗腫瘤與免疫調節等多種生理功能,但至目前為止,研究的海藻硫酸多糖主要來源於紅藻與褐藻,來源於綠藻的極少。蕨藻(Caulerparacemosa)屬綠藻門(chlorophyta)蕨藻科植物,是世界性的熱帶藻類,不僅廣泛分布於我國的台灣、海南和廣東,還分布於日本、馬來半島和太平洋東岸等地,產量高,但目前尚未得到充分利用。中藥化學成份:藻體含多糖、蕨藻毒素(caalerpicin)及蕨藻素(Caalerpin)。
基本介紹
形態特徵,生長環境,分布範圍,主要價值,提取工藝,
形態特徵
蕨藻藻體長可達3米,是單細胞生物。由假根、匍匐莖和直立枝 3部分組成,匍匐莖下面生須狀假根固著於基質上;上面生長直立枝,直立枝的形狀因種類不同而變異。藻體內充滿橫縱交錯的藻絲。細胞質內有葉綠體和白色體。以藻體斷裂分離進行營養性繁殖;為異配,異宗配合或同宗配合。60餘種,
生長環境
生長在大幹潮線下的岩石、珊瑚礁上或者中、低潮帶的沙地上。
分布範圍
主要分布在熱帶海中,中國約有12種,產於南海,盛產於南海南部沿岸。
主要價值
中國台灣省蘭嶼居民常採取本屬中的總狀蕨藻食用。藻類植物藥蕨藻科植物總狀蕨藻的藻體。
具有行氣止痛的功效,可以用於氣滯血瘀所致的各種疼痛。性味歸經:辛,溫。入心經。
需要內服:煎湯,5一10克。始載於《新華本草綱要》。
提取工藝
1.在單因素實驗基礎上,採用正交實驗,確定了總狀蕨藻多糖的提取工藝與工藝參數。總狀蕨藻多糖提取工藝為:熱水與蛋白酶酶解相結合提取。工藝參數為固液比1∶10,蛋白酶用量136.5U/g,60℃酶法提取2.5h後,再將固液比調至1∶20,在溫度95℃條件下繼續進行熱水提取2.5h,多糖得率為6.7﹪,比單純熱水提取時的多糖得率提高了131.0﹪,還大大簡化了後續繁瑣的除蛋白工藝。
2.熱水與蛋白酶酶解相結合浸提得到的總狀蕨藻多糖提取液經Sevage法和透析法等步驟初步純化後得到的總狀蕨藻硫酸多糖(CaulerpaRacemosaSulfatedPolysaccharide,簡稱為CRSP1);以DEAE-52纖維素為固定相和不同濃度的NaCl為流動相對CRSP1進行分段洗脫,分別得到0.5M和1.0MNaCl洗脫的兩個主要級分CRSP1A和CRSP1B。
3.採用苯酚-硫酸法、硫酸-咔唑法、Folin-酚法和BaCl2-明膠法分別對CRSP1、CRSP1A和CRSP1B的中性糖含量、糖醛酸含量、蛋白質含量和硫酸基含量進行了測定;採用氣相色譜法分析了CRSP1、CRSP1A和CRSP1B的單糖組分;採用胺基酸自動分析儀分析了CRSP1、CRSP1A和CRSP1B的胺基酸組成;採用Sepharose4B凝膠柱測定了CRSP1A和CRSP1B的分子量分布。化學組成測定結果顯示,CRSP1、CRSP1A和CRSP1B的中性糖含量分別為53.7﹪、36.0﹪和45.1﹪,糖醛酸含量分別為7.9﹪、3.9﹪和7.6﹪,蛋白質含量分別為9.9﹪、14.0﹪和2.0﹪,硫酸基含量分別為27.6﹪、45.6﹪和48.3﹪;氣相色譜分析結果顯示,CRSP1由11.4﹪甘露糖、56.8﹪葡萄糖和31.8﹪半乳糖組成,CRSP1A由10.9﹪甘露糖和89.1﹪葡萄糖組成,CRSP1B由0.8﹪葡萄糖和99.2﹪半乳糖組成;胺基酸分析結果顯示,CRSP1、CRSP1A和CRSP1B中的胺基酸組成相似,天門冬氨酸和谷氨酸含量異常高,其次是丙氨酸、甘氨酸和纈氨酸,色氨酸和組氨酸含量最低;分子量測定結果表明,CRSP1A和CRSP1B是至少含有兩個組分的混合物,CRSP1A由分子量為136.5×104和14.4×104的兩部分組成,CRSP1B由分子量為14.4×104和9.9×104的兩部分組成。
4.採用MTT法檢測了未去游離蛋白總狀蕨藻多糖CRSP、去游離蛋白多糖CRSP1以及CRSP1A和CRSP1B對K562細胞增殖的抑制作用,體內實驗採用灌胃給藥觀察了CRSP和CRSP1對小鼠H22實體瘤的抑制作用。結果發現,CRSP和CRSP1在體內外均具有抑制腫瘤細胞生長的作用,並且在相同劑量條件下,CRSP1的抗腫瘤活性明顯強於CRSP的抗腫瘤活性;CRSP1、CRSP1A和CRSP1B在體外對K562細胞生長都具有顯著抑制作用,同劑量下CRSP1的抑制率最高,其次是CRSP1A,CRSP1B的抑制率最低,其中CRSP1和CRSP1A在中劑量的抑制率達到最高值,而CRSP1B的抑制率隨著劑量的增加呈遞減趨勢。 5.採用腹腔注射與灌胃兩種方式給藥,觀察了CRSP1對小鼠S180肉瘤的抑制作用以及對小鼠免疫器官和碳廓清指數的影響,結果顯示,CRSP1採用腹腔注射與灌胃兩種方式給藥,對小鼠S180肉瘤均具有顯著的抑制作用,且腹腔注射能顯著地增加小鼠的脾臟指數,灌胃給藥能顯著升高小鼠碳廓清指數。這些事實表明,增強機體的免疫功能可能是總狀蕨藻多糖抗腫瘤作用的機制之一。 6.採用體外免疫試驗方法檢測了CRSP1、CRSP1A和CRSP1B直接或協同有絲分裂原ConA對正常小鼠脾淋巴細胞的增殖作用以及其對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬中性紅和分泌一氧化氮的影響。結果顯示,三者在一定劑量範圍內,直接或協同有絲分裂原ConA對小鼠脾淋巴細胞增殖均有一定的促進作用,還能夠有效地促進小鼠腹腔巨噬細胞MΦ吞噬中性紅和分泌NO的數量,說明CRSP1、CRSP1A和CRSP1B能增強機體的免疫功能,進而發揮抗腫瘤作用。