蒽環類抗生素通過RFX1引起HBV再激活的機制研究

《蒽環類抗生素通過RFX1引起HBV再激活的機制研究》是依託北京大學，由魯鳳民擔任負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：蒽環類抗生素通過RFX1引起HBV再激活的機制研究
• 項目負責人：魯鳳民
• 依託單位：北京大學
• 項目類別：面上項目

項目摘要

蒽環類抗生素是常用的腫瘤化療藥物。使用蒽環類抗生素可引起處於免疫控制狀態的慢性HBV感染者、甚至既往感染者的HBV再激活，但其機制尚未充分闡明。調節因子RFX1是一種DNA損傷效應蛋白，參與DNA損傷修復。研究表明，RFX1可與HBV 增強子I區的EP位點和核心啟動子區的類EP位點結合，反式激活HBV轉錄，進而促進HBV複製。我們的前期研究發現，蒽環類抗生素的代表性藥物阿黴素及其衍生物表阿黴素在體外不僅促進HBV複製，還能上調RFX1表達，且二者變化趨勢一致。但將HBV增強子I區的EP位點突變後，阿黴素對HBV複製水平的促進作用明顯減弱。據此推測，蒽環類抗生素可通過上調RFX1表達，增強HBV增強子I的轉錄活性，進而促進HBV複製。本課題將探索蒽環類抗生素通過RFX1引起腫瘤患者HBV再激活的新機制，為靶向預防腫瘤化療過程中HBV再激活、提高腫瘤療效提供依據。

結題摘要

包括阿黴素在內的蒽環類抗生素可直接促進B型肝炎病毒（HBV）複製，但其機制尚未充分闡明。我們在本研究中發現調節因子（RFX1）可介導阿黴素對HBV複製的促進作用，並揭示了阿黴素通過RFX1促進HBV複製的機制。我們首先發現HBV複製水平和RFX1表達水平在阿黴素處理後同步增加，並且阿黴素可顯著增加RFX1與HBV增強子I的結合水平。當內源RFX1被敲減後，阿黴素促進HBV複製的能力顯著減弱。位於HBV增強子I中的EP序列可介導RFX1與HBV增強子I的結合，當EP序列突變後，阿黴素促進HBV複製的能力也顯著減弱。由此可見，阿黴素主要通過上調RFX1的表達水平，增加RFX1與HBV增強子I的結合水平，進而增強HBV增強子I的轉錄活性，促進HBV複製。此外，我們發現在A～D基因型HBV基因中存在兩種相對保守的EP序列，而無論含有哪種EP序列，阿黴素均可促進HBV複製。 據報導，阿黴素可上調轉錄因子SOX4表達，而SOX4可通過與HBV基因組中的AACAAAG序列結合促進HBV複製，提示SOX4可能也介導了阿黴素對HBV複製的直接促進作用。然而，我們通過序列比對發現，AACAAAG序列僅在少數HBV病毒株中存在，也就是說，大部分HBV病毒株的基因組中不含有該序列。因此，本研究進一步探討了SOX4在調控HBV複製中的作用及其機制。結果發現，SOX4僅對少數含有AACAAAG序列的HBV病毒株的複製水平起到促進作用，而抑制大部分HBV病毒株的複製。進一步研究發現，SOX4可下調肝細胞核因子4α（HNF4α）的表達水平，而HNF4α可直接促進HBV複製；當內源HNF4α敲減後，SOX4對HBV複製的抑制作用顯著減弱。由此可見，SOX4一方面通過與AACAAAG序列結合促進少數HBV病毒株複製，另一方面通過下調肝細胞核因子4α（HNF4α）的表達來抑制HBV複製。 總之，本研究部分揭示了包括阿黴素在內的蒽環類抗生素促進HBV複製，進而引起HBV再激活的分子機制，為尋求抗HBV再激活的潛在藥物靶點提供理論依據。