菌落PCR(Colony PCR)可不必提取目的基因DNA,不必酶切鑑定,而是直接以菌體熱解後暴露的DNA為模板進行PCR擴增,省時少力。建議使用載體上的通用引物來篩選陽性克隆。通常利用此pcr的方法進行篩選插入的目的基因或者DNA測序分析。最後的PCR產物大小是載體通用引物之間的片斷大小。 基本介紹 中文名:菌落PCR外文名:Colony PCR 介紹,具體方法, 介紹菌落PCR與我們通常的普通DNA的PCR的不同在於,菌落pcr直接以單個菌作為模板。是一種可以快速鑑定菌落是否為含有目的基因的陽性菌落。具體方法標準操作方法:用高壓滅菌的牙籤或槍頭挑取單個菌落。先在抗性平板上點單克隆保存(標記),然後置於20ul Triton-x100(或去離子水)中攪和一下。將裝有20ul Tritonx-100的EP管在100°C下煮2分鐘.取1ul上清為模板,加入PCR體系進行PCR反應,建議PCR體系為20ul。瓊脂糖凝膠電泳觀察結果。