范氏測定纖維素含量法

採用范氏(Van Soest)的洗滌纖維分析法測定中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF) 原理。

原理,試劑的配製,操作步驟,中性洗滌纖維測定,酸性洗滌纖維測定,結果計算,範式分析法圖,

原理

植物性飼料經中性洗滌劑煮沸處理,不溶解的殘渣為中性洗滌纖維,主要為細胞壁成分,其中包括半纖維素、纖維素、木質素和矽酸鹽。植物性飼料經酸性洗滌劑處理,剩餘的殘渣為酸性洗滌纖維,其中包括纖維素、木質素和矽酸鹽。酸性洗滌纖維經72%硫酸處理後的殘渣為木質素和矽酸鹽,從酸性洗滌纖維值中減去72%硫酸處理後的殘渣為飼料的纖維素含量。將72%硫酸處理後的殘渣灰化,在灰化過程中逸出的部分為酸性洗滌木質素(ADL)的含量。
基於Van Soest原理的纖維素含量分析系統

試劑的配製

中性洗滌劑(3%十二烷基硫酸鈉):準確稱取18.6g乙二胺四乙酸二鈉(EDTA,C10H14O8Na2·2H2O,分析純)和6.8g硼酸鈉 (Na2B4O7·10H2O,分析純)放入燒杯中,加入少量蒸餾水,加熱溶解後,再加入30g十二烷基硫酸鈉(C12H25NaO4S,分析純)和 10ml乙二醇乙醚(C4H10O2,分析純);再稱取4.56 g無水磷酸氫二鈉(Na2HPO4,分析純)置於另一燒杯中,加入少量蒸餾水微微加熱溶解後,倒入前一個燒杯中,在容量瓶中稀釋至1000ml,其中pH 值約為6.9~7.1(pH值一般勿需調整); 1N硫酸:量取約27.87 ml濃硫酸(分析純,比重1.84,98%),徐徐加入已裝有500ml蒸餾水的燒杯中,冷卻後注入1000ml容量瓶定容,標定; 酸性洗滌劑(2%十六烷三甲基溴化銨):稱取20g十六烷三甲基溴化銨(CTAB,分析純)溶於1000ml1N硫酸,必要時過濾;

操作步驟

中性洗滌纖維測定

準確稱取1.0000g樣品(通過40目篩)置於直筒燒杯中,加入100ml中性洗滌劑和數滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉。將燒杯套上冷凝裝置於電爐上,在5~10min內煮沸,並持續保持微沸60min。煮沸完畢後,取下直筒燒杯,將燒杯中溶液倒入安裝在抽濾瓶上的已知重量的玻璃坩堝中進行過濾,將燒杯中的殘渣全部移入,並用沸水沖洗玻璃坩堝與殘渣,直洗至濾液呈中性為止。用20ml丙酮沖洗二次,抽濾。

酸性洗滌纖維測定

準確稱取1.0000g樣品(通過40目篩)置於直筒燒杯中,加入100 ml酸性洗滌劑和數滴十氫化萘及趁熱用已知重量的玻璃坩堝抽濾,並用沸水反覆沖洗玻璃坩堝及殘渣至濾液呈中性為止。用少量丙酮沖洗殘渣至抽下的丙酮液呈無色為止,並抽淨丙酮。將玻璃坩堝置於105℃烘箱中烘2h後,在乾燥器中冷卻30 min稱重,直稱至恆重。
酸性洗滌木質素和酸不溶灰分(AIA)測定 將酸性洗滌纖維加入72%硫酸,在20℃消化3h後過濾,並沖洗至中性。消化過程中溶解部分為纖維素,不溶解的殘渣為酸性洗滌木質素和酸不溶灰分,將殘渣烘乾並灼燒灰化後即可得出酸性洗滌木質素和酸不溶灰分的含量。

結果計算

中性洗滌纖維含量的計算:NDF(%)=(W1-W2)/ W×100
式中:
W1—玻璃坩堝和NDF重(g) W2—玻璃坩堝重(g) W—試樣重(g)
酸性洗滌纖維含量的計算:ADF(%)=(G1-G2)/G×100
式中:G1—玻璃坩堝和ADF重(g) G2—玻璃坩堝重(g) W—試樣重(g)
半纖維素含量的計算:半纖維素(%)=NDF(%)-ADF(%)
纖維素含量的計算:纖維素=ADF(%)-經72%硫酸處理後的殘渣(%)
酸性洗滌木質素(ADL)含量的計算:ADL(%)=殘渣(%)-灰分(矽酸鹽,%)

範式分析法圖

範式分析法圖示:
范氏測定纖維素含量法

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