艾拉莫德靶向接頭蛋白Act1的分子基礎及Act1的靶標屬性研究

《艾拉莫德靶向接頭蛋白Act1的分子基礎及Act1的靶標屬性研究》是依託南京大學，由羅瓊擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：艾拉莫德靶向接頭蛋白Act1的分子基礎及Act1的靶標屬性研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：羅瓊
• 依託單位：南京大學

項目摘要

我們的前期研究發現新型DMARD藥物艾拉莫德可選擇性抑制IL-17信號從而改善小鼠膠原性關節炎，其機制與傳統用藥甲氨蝶呤、來氟米特等不同，初步證實其靶蛋白為IL-17信號中的接頭蛋白Act1，但其詳細作用機制仍不明，Act1的靶標屬性亦有待確立。作為第1個Act1抑制劑，本項目擬深入闡明艾拉莫德與Act1結合的分子基礎，包括用多種方法確證其結合，進一步藉助計算機模擬、肽段截短和胺基酸突變等確定二者結合的結構功能域和位點。在此基礎上考察艾拉莫德靶向Act1後對於Act1本身及Act1招募形成的複合體相關蛋白成員的影響。進一步藉助艾拉莫德及其衍生物、Act1的siRNA或抗Act1抗體、靶向Act1特定功能域或位點的肽段等手段，探討靶向Act1對治療相關疾病的改善作用，從而揭示Act1在IL-17相關疾病中的關鍵靶標地位，為基於這種結構基礎的藥物設計和建立治療免疫炎症相關疾病的新方法打下基礎。

結題摘要

接頭蛋白是信號通路中的關鍵節點分子，調控接頭蛋白對於控制炎症反應至關重要。Act1是IL-17信號通路中必需的接頭蛋白，以其為靶標的藥物治療還甚為少見。我們前期研究發現艾拉莫德可選擇性抑制IL-17信號從而改善小鼠膠原性關節炎，但詳細機制不明。本項目首先通過親和純化共沉澱、雷射共聚焦、等溫量熱滴定等方法證實了艾拉莫德與Act1的結合。進一步藉助計算機模擬，通過構建不同結構功能域缺失和不同胺基酸位點突變的表達質粒，闡明了艾拉莫德與Act1結合的結構功能域和結合位點。另一方面，我們以艾拉莫德為母核，設計併合成了一系列艾拉莫德類似物，探討不同取代基形成的空間構型與Act1的相互作用。此外，我們還建立了小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎動物模型，通過小鼠體重變化、發病率、病變行為評分以及脊髓脫髓鞘程度考察了艾拉莫德的治療作用。本項目為Act1的作用機理及其在IL-17相關炎症性疾病中的關鍵靶標地位提供了新的理論詮釋。