自噬對心肌微血管內皮細胞間質轉分化的影響及機制

《自噬對心肌微血管內皮細胞間質轉分化的影響及機制》是依託南昌大學，由李賓公擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：自噬對心肌微血管內皮細胞間質轉分化的影響及機制
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：李賓公
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

內皮細胞間質轉分化（EndMT）在心肌纖維化發病過程中有重要意義，然而目前尚無抑制EndMT的特殊方法。自噬與眾多纖維化疾病關係密切，但自噬與EndMT之間關係的研究尚無報導。我們初步研究結果表明，缺血缺氧條件下可誘導心肌微血管內皮細胞（CMVE）發生EndMT，抑制Notch信號系統可抑制EndMT。本課題將通過缺血缺氧條件下誘導CMVE發生自噬及EndMT，通過藥物及基因轉染、基因沉默方式調控自噬，觀察調控自噬對EndMT的影響，並對自噬與EndMT之間Notch、Wnt信號通路做詳細研究以確定自噬對EndMT影響機制。製作大鼠心肌梗死模型，研究體內調控自噬對EndMT、心肌纖維化、心功能的影響及其機制。本課題通過研究自噬與EndMT的相互影響及機制，將為EndMT提供新的發病機制及干預靶點，嘗試調控自噬干預EndMT，進而為心肌纖維化治療開闢新的途徑。

結題摘要

在多種心臟病中，內皮細胞間質轉分化(Endothelial-to-mesenchymal transition, EndMT) 可促進心肌纖維化的進展。同時，有大量研究表明自噬亦參與了心肌纖維化的調控。然而自噬調控心肌纖維化的具體分子機制尚未明確。本研究旨在探究自噬，EndMT及心肌纖維化三者之間的關係及分子機制，並試圖找到抗心肌纖維化的有效手段。本研究體內實驗證實在缺氧培養下的心肌微血管內皮細胞自噬及EndMT可同時被誘導發生。在缺氧條件下，加入自噬激活劑雷帕黴素可進一步提高細胞自噬水平，有效抑制EndMT；相反，加入自噬抑制劑3-MA或氯喹可抑制自噬水平，加速缺氧誘導的EndMT現象。TGFβ-Snail信號途徑是引起EndMT的常見信號通路。通過雷帕黴素、3-MA或氯喹干預自噬並不會缺氧誘導內皮細胞自分泌TGFβ，但會影響下游信號分子Snail的表達。自噬標誌蛋白LC3及Snail的雙重螢光染色證實，自噬介導了缺氧狀態下內皮細胞Snail蛋白的降解，從而影響EndMT。體內實驗證實，EndMT參與了SD大鼠心肌梗死後心肌纖維化。通過雷帕黴素處理的心梗大鼠EndMT減弱，纖維化面積減少，心功能改善。而3-MA處理的心梗大鼠EndMT顯著，纖維化面積增加，心功能改善不明顯。總之，自噬可作為一種細胞自我保護機制對抗缺氧誘導的EndMT，從而抑制心肌纖維化，改善心功能。自噬可能作為一種潛在的治療心肌梗死心肌纖維化的靶點。