膠束增敏螢光法

膠束增敏螢光法的定義

膠束增敏螢光分析（ micellar enhanced fluorometry）化學方法也可用來提高螢光效率，從而提高螢光分析的靈敏度。例如膠束溶液對螢光物質有增溶、增敏和增穩的作用。20世紀70年代後發展成膠束增敏螢光法。

膠束增敏螢光法的原理

膠束溶液即濃度在臨界濃度以上的表面活性劑溶液。表面活性劑（如十二烷基硫酸鈉）的化學結構中都具有一個極性的親水基和一個非極性的疏水基在極性溶劑（如水）中，幾十個表面活性劑分子聚合成團，將非極性的疏水基尾部靠在一起，形成親水基向外、疏水基向內的膠束。極性較小而難溶於水的螢光物質在膠束溶液中溶解度顯著增加。

例如室溫時芘在水中的溶解度為

~

，而在十二烷基硫酸鈉的膠束水溶液中溶解度為0.043mol/ L。膠束溶液對螢光物質的增敏作用是因非極性的有機物與膠束的非極性尾部有親和作用，減弱了螢光質點之間的碰撞，減少了分子的無輻射躍遷，增加了螢光效率，從而增加了螢光強度。除此之外，因為螢光物質被分散和定域於膠束中，降低了由於螢光熄滅劑的存在而產生的熄滅作用，也降低了螢光物質螢光自熄滅，從而使螢光壽命延長，對螢光起到增穩作用。由於膠束溶液的增溶、增敏和增穩的作用，因此可大大提高螢光分析法的靈敏度和穩定性。

測定方法

膠束增敏螢光法測定方法與普通的螢光分析方法一致。

以番茄紅素的測量舉例說明：

1 主要試劑

番茄紅素（98%），丙酮（分析純），十六烷基三甲基溴化銨（CTMAB，分析純），其它試劑均為分析純，試驗用水為二次蒸餾水。

2 溶液的配製

（1）番茄紅素溶液：準確稱取番茄紅素0.0537g，加入丙酮溶液溶解後，定容於100 mL容量瓶中，搖勻，配成

mol/L的儲備液。取37.3mL儲備液，加入100 m L容量瓶中定容，配製成200 μg/m L的工作液。

（2）三酸緩衝溶液：取硼酸0.618 3 g，85%的磷酸0.68 mL，36%的乙酸1.16 mL，用二次蒸餾水配製250 mL 0.04 mol/L混合酸，再取一定量的混合酸與不同體積0.2 mol/mL氫氧化鈉溶液混合，可配製不同pH的緩衝液。

（3）CTMAB溶液：稱取十六烷基三甲基溴化銨0.3644g，用二次蒸餾水並加熱至60 ℃使其完全溶解，冷卻後定容到100 mL容量瓶中，濃度為0.01 mol/L。

3 試驗方法

移取1.0 mL 200μg/mL的番茄紅素溶液於10 mL的比色管中，加入3 mL pH11.0的三酸緩衝溶液，5mL0.01 mol/LCTMAB溶液，用二次蒸餾水定容，充分振盪後，在60 ℃水浴鍋中加熱10 min，測其螢光強度。