《腫瘤相關糖類抗原Tn與結直腸癌發病機理的關係研究》是依託中南大學，由劉小偉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：腫瘤相關糖類抗原Tn與結直腸癌發病機理的關係研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉小偉
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
O型糖基化異常是結直腸癌細胞的顯著特徵之一，Tn抗原陽性檢出率超過90%，與轉移潛力密切相關。Tn抗原是正常粘蛋白型O聚糖生物合成的中間產物，受糖基轉化酶T-synthase及分子伴侶Cosmc調控，T-synthase 酶活性缺失可致Tn抗原表達。但Tn抗原與結直腸癌的發生、侵襲轉移的聯繫尚不清楚。本研究前期構建了腸上皮細胞Tn抗原表達的小鼠模型，以模擬人結直腸癌細胞的Tn抗原表達，發現T-synthase活性去除後，腸上皮細胞Tn抗原高表達，並發生結腸腫瘤。下一步我們擬用已建立的動物研究對象，和臨床收集到的各發展階段結直腸癌手術切除標本、內鏡下活檢或內鏡下腫瘤切除標本，探討Tn抗原在結直腸癌發生機理中的作用；從人結直腸癌組織標本篩查Cosmc基因突變，研究結直腸癌Tn抗原表達的機理；最後將篩查相關Tn+ O型糖蛋白分子，為結直腸癌的分子診斷、預後監測以及防治提供新的靶標。
結題摘要
近來研究發現癌症的發病與蛋白的高度糖基化相關，癌細胞表面高表達的N-一乙醯半乳糖（GalNAc）是糖基化改變的特徵。粘蛋白的是高度糖基化的O-糖蛋白，在細胞粘附、增殖、凋亡、腫瘤形成中發揮重要的作用。粘蛋白相關的Tn抗原是由N- GalNAc共價結合O-絲氨酸/蘇氨酸形成，在健康正常組織及良性腫塊中不表達，但在90%人類癌性組織中高表達。近來研究發現結腸癌患者存在高表達的Tn抗原，Tn抗原能夠促進轉化生長因子β(TGF-β)分泌，改變腫瘤微環境，促進腫瘤轉移。綜上，我們認為Tn抗原在結腸癌的發生髮展中發揮重要的作用。因此，我們利用iTRAQ技術篩選Tn+ CRC,Tn- CRC,NC 組織及Tn+,Tn-LS174T細胞中差異表達的蛋白，尤其是O-糖基化的蛋白。組織蛋白標本的篩選發現55種差異表達的糖蛋白，其中19種O型糖蛋白；細胞蛋白標本篩選出1266種差異表達的蛋白，其中11種糖蛋白，結合深度功能分析結果，篩選出參與結腸癌發生髮展的三種糖蛋白HnRNP M,Decorin及SORBS1，並在組織及細胞水平利用Western blotting，IHC、基因沉默等方法進行驗證，結果同iTRAQ一致：HnRNP M在Tn+結腸癌組織及細胞中表達增多，並且與LS174T細胞的存活及侵襲性密切相關，而Decorin及SORBS1在Tn+結腸癌組織及細胞中表達下調，並通過TGF-b, PPAR 通路參與了結腸癌的發生髮展。因此，我們認為Tn抗原表達水平不同導致組織不同的蛋白表達模式，尤其是糖蛋白表達，蛋白HnRNP M，Decorin,SORBS1可能在結腸癌的發生髮展中發揮了重要作用，並可能作為結腸癌診斷、治療、判斷預後的新標誌物。
