腫瘤抑制基因M101的克隆與功能分析

《腫瘤抑制基因M101的克隆與功能分析》是依託南開大學，由吳世安擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：腫瘤抑制基因M101的克隆與功能分析
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：吳世安
• 依託單位：南開大學

中文摘要

生長是動物發育最基本的環節之一，但控制器官大小的發育機制依然不清楚，比如器官發育到正確大小後如何停止生長？器官如何感受損壞與再生及再生停止？Hippo信號通路作為控制器官大小發育的關鍵機制之一，為研究這些問題提供了新的研究視角。Hippo信號通路包括Hippo-Warts核心激酶鏈、上游調節因子和下游轉錄激活蛋白，其中對上游調節因子及其調節機制仍然不十分清楚。申請人實驗室利用果蠅模型，通過表型修飾篩選得到若干影響Hippo蛋白功能的EMS突變株。初步研究表明這些因子可以負調控器官大小的發育，其中M101突變株具有腫瘤抑制基因的特徵，通過誘導產生的M101突變組織具有明顯的過度生長或形成腫瘤。本項目將對引起M101突變株產生突變表型的基因進行定位和克隆，並探討其調控Hippo通路或獨立影響器官大小發育的分子機制。

結題摘要

器官或個體的大小是生物界類群間最顯著的特徵之一，受到機體內外複雜因素的協調控制，然而控制器官大小發育的分子機制依然不完全清楚。比如器官發育到正確大小後如何停止生長？器官如何感受損傷到啟動再生及再生停止？異常調節如何導致諸如癌症等疾病的發生？越來越多的研究表明，內在的遺傳因素在控制器官大小發育及腫瘤發生過程發揮關鍵作用。利用EMS誘變劑和FRT/ey-FLP篩選系統，我們鑑定到5個具有相似表型的突變株（82-01，82-06，82-10，82-50，82-55），它們構成一個單一的互補群（命名為M101）。該突變互補群具有腫瘤抑制基因特性，ey-FLP表達可以導致果蠅眼睛呈腫瘤樣過度生長，且與調節器官大小發育的Hippo信號通路具有明顯的遺傳學相互作用。通過本項目的實施，我們對M101互補群突變株對應的突變基因進行了定位，確定了相應的基因突變並進行了基因克隆。測序結果表明，M101所有突變株分別含有腫瘤抑制基因Hyd不同位點突變，但82-06和82-10突變株除了各自的Hyd突變外，還分別含有腫瘤抑制基因dRASSF和Wts突變位點。鑒於dRASSF在我們的其它實驗體系中被鑑定為Hippo通路中激酶Hpo活性的激活因子，本項目重點解析了dRASSF激活Hippo通路活性的分子機制。另外，我們揭示了Hippo通路在果蠅卵巢幹細胞發育中的重要作用以及Hippo信號通路核心組分Wts和Sav活性的新的調節機制。我們也正在探討Hyd與Hippo通路之間可能的相互作用。