《腫瘤微囊泡中microRNA-23a調節樹突狀細胞分化的作用機制》是依託四川大學，由龔鳳鳴擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：腫瘤微囊泡中microRNA-23a調節樹突狀細胞分化的作用機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：龔鳳鳴
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腫瘤分泌的微囊泡(Microvesicle, MV)在腫瘤微環境中起重要作用，MV可以降低免疫細胞活性，促進免疫耐受，發揮免疫抑制功能。本課題前期研究發現小鼠結直腸癌細胞分泌MV抑制髓系樹突狀細胞分化，促進DC細胞凋亡，降低DC細胞抗原攝取、遞呈能力、IL-12p70分泌減少；miRNA晶片發現miRNA-23a在MV中明顯富集，表達miRNA-23a慢病毒感染DC發現DC細胞表型改變，由此推測miRNA-23a可能調控髓系DC細胞分化，目前未見miRNA-23a調節DC功能的報導。本研究採用miRNA晶片、生物信息學分析、螢光素酶報告基因和RNAi干擾等研究手段，對腫瘤MV中miRNA-23a調節DC細胞功能及其靶基因進行研究，揭示其作用機制；豐富腫瘤MV中miRNA對DC細胞分化調控的理論，為探討腫瘤發生機制及治療提供新思路。
結題摘要
腫瘤細胞分泌的微囊泡(Microvesicle, MV)在腫瘤微環境中發揮重要作用，MV 可以降低免疫細胞活性，促進免疫耐受，發揮免疫抑制功能。本課題前期研究發現小鼠結直腸癌細胞CT26分泌MV抑制樹突狀細胞(Dendritic，DC)分化，促進DC細胞凋亡，降低DC細胞抗原攝取、遞呈能力、IL-12p70分泌減少；miRNA表達譜晶片發現miRNA-23a在CT26腫瘤細胞分泌的MV中明顯富集，構建表達miRNA-23a慢病毒載體，感染DC細胞後發現DC細胞表型改變，DC細胞抗原攝取和遞呈能力降低、IL-12p70分泌減少，由此推測miRNA-23a調控髓系DC細胞分化；結合多個軟體分析確定miRNA-23a調控的目的靶基因為STAT5B，構建螢光素梅報告基因載體，結果顯示和對照組比較表達STAT5B-WT 3’-UTR載體抑制螢光素酶活性，證實miRNA-23a調控的目的靶基因為STAT5B；進一步研究發現RNAi干擾DC細胞中STAT5B後，DC細胞功能受到影響，IL-6、IL-12p70分泌減少。體內實驗證實接種小鼠結直腸癌細胞後，小鼠血漿和骨髓中mi-RNA23a表達增加，DC細胞抗原攝取和遞呈能力降低；本研究結果表明CT26腫瘤細胞分泌的MV中miRNA-23a通過調控靶基因STAT5B影響DC細胞功能。證實CT26腫瘤細胞分泌MV中miRNA-23a通過STAT5B調節DC細胞的分化，影響DC抗原攝取和遞呈功能及IL-6、IL-12p70分泌減少；本研究結果為進一步分析腫瘤細胞分泌的MV中miRNA含量作為腫瘤檢測靶標及治療靶點提供理論依據，為確定MV中miRNA-23a的靶基因和治療靶點提供理論和實驗基礎，進一步為探討疾病的發生機制和診斷及治療提供新的思路。
