《腫瘤壞死因子誘導蛋白TNFAIP1在阿爾茲海默病發生中的作用》是依託湖南師範大學，由劉寧擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：腫瘤壞死因子誘導蛋白TNFAIP1在阿爾茲海默病發生中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉寧
- 依託單位：湖南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
阿爾茲海默病（AD）嚴重威脅人類健康。AD患者腦神經細胞間澱粉樣蛋白（Aβ）沉積誘發的神經元死亡，是AD發生的重要病理基礎。抑制Aβ斑塊的產生及其誘導的神經死亡具有潛在干預AD的作用。申請者前期研究表明，腫瘤壞死因子誘導的蛋白1（TNFAIP1）在AD小鼠模型（APP/PS1）大腦海馬、Aβ25-35刺激的小鼠皮層神經元中表達上調，並介導Aβ25-35對CREB信號通路的抑制及其誘導的神經凋亡。因此，我們推測TNFAIP1促進了AD發生。本研究擬通過APP/PS1小鼠分析TNFAIP1在AD發生過程中的表達和定位，利用雙側海馬定位注射TNFAIP1過表達或沉默腺相關病毒（AAV）分析TNFAIP1對APP/PS1小鼠大腦病理改變和學習記憶功能的影響，並利用小鼠原代海馬神經元分析TNFAIP1在Aβ誘導的神經元凋亡中作用及分子機制。該研究為理解AD發病機制及干預AD提供新的思路。
結題摘要
研究背景：阿爾茨海默氏病（AD）是對人類生命和健康的重大威脅。 AD患者大腦中神經元內β-澱粉樣蛋白（Aβ）斑塊的積累導致神經元細胞死亡，這是觸發AD發病機制中多種變化的關鍵因素。抑制Aβ誘導的神經元細胞死亡可能有助於AD的干預和治療。我們先前的研究已經報導了腫瘤壞死因子α誘導蛋白1（TNFAIP1）是由小鼠神經元細胞誘導並促進Aβ25-35誘導的神經毒性，但是TNFAIP1的作用和調控機制仍然未知。主要研究內容：採用Western blotting，免疫組織化學，免疫螢光和RT-qPCR技術分析WT和APP / PS1小鼠皮層和海馬中TNFAIP1和p-TNFAIP1的表達和定位。使用共免疫沉澱法研究TNFAIP1與RhoB的相互作用。採用MTT法，JC-1法研究神經元線粒體功能。 CM-H2DCFDA探針用於研究細胞內ROS的產生。通過蛋白質印跡分析和PI-Annexin V FACS檢測Caspase 3蛋白來研究細胞凋亡。重要的結果和關鍵數據：在這項研究中，我們的實驗結果表明，APPA / PS1小鼠的皮層和海馬腦神經元中過表達TNFAIP1和p-TNFAIP1（TNFAIP1的Ser280磷酸化），並且涉及轉錄因子NF-κB在Aβ誘導的TNFAIP1上調。此外，我們的結果表明，TNFAIP1介導了Aβ誘導的活性氧（ROS）產生，線粒體膜電位（∆m）下降，以及人SH-SY5Y細胞的神經元細胞死亡。我們進一步揭示，Aβ增加了TNFAIP1與RhoB的結合，而敲低RhoB則減弱了TNFAIP1誘導的人SH-SY5Y細胞凋亡。科學意義：這些數據表明TNFAIP1與AD的發病機理密切相關，並且TNFAIP1在AD腦神經元中的過表達，至少部分通過RhoB信號傳導起凋亡作用。該研究深入分析了TNFAIP1在AD中的作用和分子機制，並為AD的診斷和治療提供了新的策略和手段。
