腎癌特異性配體多肽ZT-2功能確認和新標誌物的研究

《腎癌特異性配體多肽ZT-2功能確認和新標誌物的研究》是依託中山大學，由塗響安擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：腎癌特異性配體多肽ZT-2功能確認和新標誌物的研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：塗響安
• 依託單位：中山大學

中文摘要

腎癌是泌尿系統常見的惡性腫瘤之一，具有早期診斷困難、藥物療效差等特點。腫瘤標誌物是腎癌早期診斷的希望，但目前尚無可靠的標誌物能用於腎癌的普查及早期診斷。我們利用前期工作構建的人源性抗人腎癌細胞抗體庫，從中篩選到一種新的腎癌配體多肽ZT-2， 免疫組化分析進一步證實ZT-2在腎癌組織中特異性異常高表達，但其機制尚不清楚。我們首次提出ZT-2作為新的腎癌標誌物的可能性。本課題已成功構建了ZT-2慢病毒，實現了在腎癌細胞中過表達ZT-2,擬進一步採用組織晶片、血清Elisa檢測、PCR、RNAi等技術，評價ZT-2作為腎腫瘤標誌物的可能性、探討ZT-2的功能並闡述其調控機制。本課題有望揭示腎癌發生的新機制，獲得ZT-2成為新的腎癌臨床診斷標誌物的可靠證據，為腎癌的早期診斷、靶向性治療奠定基礎。

結題摘要

① 腎癌是泌尿系統常見的惡性腫瘤之一，具有早期診斷困難、藥物療效差等特點。上皮和內皮酪氨酸激酶ETK高表達於多種腫瘤細胞和組織，並在腫瘤發生、發展以及遷移和轉移過程中發揮重要作用。我們首先運用組織晶片技術發現腎癌組織中ETK表達明顯高於癌旁正常腎組織，ETK的表達水平與腎癌的分期、分化程度、有無轉移以及病人生存時間密切相關。進一步我們檢測到ETK在5個腎癌細胞株786-O, 769-P, A-498, ACHN, OS-RC-2上都高度表達而在腎近端小管細胞HK-2上幾乎沒有表達。敲除兩個典型的透明細胞腎癌細胞系786-O和769-P中ETK的表達後細胞增殖水平、轉移和侵襲水平明顯降低了，凋亡水平明顯升高；並且細胞內VEGF和pSTAT3的表達降低了。我們的研究結果表明ETK的表達與腎癌的惡性程度及進展程度有一定正相關關係，有可能作為一個早期篩選和預後預測的標記物，並且ETK可能通過VEGF-ETK-STAT3通路發揮作用，有可能成為治療腎癌的新靶點。② VHL病（Von Hippel-Lindau disease）是常染色體顯性遺傳的多系統腫瘤病，是由於VHL腫瘤抑制基因突變導致，VHL病人最常見的死亡原因是腎細胞癌。我們對一個獨特的中國人VHL家系進行了基因研究並且分析了VHL蛋白的穩定性。在這個家族中我們發現2個病人和1個攜帶者，其VHL基因外顯子1第515個核苷酸上具有一個T到G的雜合錯義突變，導致VHL蛋白上第101個胺基酸從亮氨酸的轉變為精氨酸。這個VHL基因突變家族是亞洲首例報導，我們發現這個錯義突變顯著降低了VHL蛋白的穩定性並且促進了腎細胞癌的發生，對於VHL疾病的早期診斷以及遺傳阻斷具有十分重要的意義。③ 梗阻性無精子症、精索靜脈曲張、慢性睪丸痛的治療一直是泌尿男科學領域的難題。我們在國際率先報導了改良單針法顯微輸精管附睪吻合術，縮短了手術時間、降低了手術複雜程度並取得較好效果；證實了經尿道雙極等離子輸精管切開術用於治療射精管梗阻性無精子症具有效率高、術後恢復快、併發症少、術後效果好的特點；國內首例報導了顯微精索去神經術治療特發性慢性睪丸痛以及顯微輸精管吻合術治療輸精管結紮術後頑固性睪丸痛；開展了顯微腹股溝下精索靜脈結紮術，與腹膜後高位結紮術相比復發率較低，自然妊娠率、精液改善率和疼痛緩解率較高。