《腎小球足細胞UCH-L1異常表達在腎炎發病中的意義》是依託復旦大學，由張志剛擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：腎小球足細胞UCH-L1異常表達在腎炎發病中的意義
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張志剛
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們前期研究證實，泛素羧基端水解酶－1（UCH-L1）在腎炎組織的足細胞中表達升高；體外足細胞實驗也表明UCH-L1表達增強與免疫複合物刺激有關；並證實足細胞有FcγR等受體表達。本課題將繼續以體外人足細胞和大鼠Heymann膜性腎病模型為研究對象, 採用轉基因、基因干擾和蛋白質分析等方法，檢測在免疫複合物作用下，足細胞的FcγR、IgAR和FcRn免疫受體及其相關胞內信號分子的表達，並分析其與UCH-L1表達的相關性，研究免疫複合物上調UCH-L1表達的分子機制；再通過對足細胞UCH-L1與synaptopodin，actin和α-actinin-4表達的檢測，及其對RhoA信號分子和α-actinin-4的泛素化調節作用的研究，探索UCH-L1對足細胞骨架蛋白表達和腎小球濾過功能的影響。期望闡明足細胞UCH-L1異常表達在腎炎發病中的意義，為臨床防治腎病尋找新的治療靶點而提供理論基礎。
結題摘要
我們前期研究證實，泛素羧基端水解酶－1（UCH-L1）在腎炎組織的足細胞中表達升高；本項目在此基礎上，進一步研究足細胞UCH-L1異常表達的調節機制及對足細胞表型的影響作用。在體外實驗中，證明了免疫複合物可刺激足細胞的新生兒Fc受體（FcRn）激活，進而引起UCH-L1表達升高。而足細胞的FcRn上調UCH-L1的表達是經MAPK-p38 信號傳導途徑調控。進一步研究發現，上述激活通路的下游受到NF-kB的調節。套用螢光素酶報告基因實驗證實在UCH-L1啟動子上有兩個特異的NF-κB結合位點。激活或干擾p65可以明顯改變UCH-L1的表達，並且在狼瘡腎炎活檢標本中p65與UCH-L1的表達呈正相關。這些結果很好的闡明了腎炎病變中足細胞UCH-L1上調的重要調控機制。另一方面，進一步研究了UCH-L1、synaptopodin等相關蛋白表達對足細胞生物學表型的影響，並發現足細胞與神經元有許多共同蛋白表達，如NSE、Nestin、NeuN，及這些蛋白對維持足細胞的特殊形態具有重要作用。而且Synaptopodin是通過RhoA通路對足細胞骨架結構進行調控的。體內實驗我們在大鼠Heymann 膜性腎炎、大鼠抗Thy1.1系膜增生腎炎模型及大鼠阿黴素腎病模型中，首次套用體內注射外源性的攜帶有綠色螢光蛋白的逆轉錄病毒載體MSCV-GFP及BrdU，追蹤標記腎病模型中分裂增生的足細胞，證實足細胞損傷後存在增生修復現象。免疫組化則證實人常見腎炎如急性腎小球腎炎、IgA腎病、膜性腎炎、狼瘡性腎炎等腎炎組織中，足細胞的PCNA的陽性升高。體外培養足細胞在炎症刺激後也證實細胞周期激酶激活。這是首次在體內實驗中顯示了足細胞增生的直接證據。從而為足細胞損傷的腎臟疾病的治療提供了新的突破點。這些工作為深入闡明足細胞UCH-L1在腎炎發病中異常表達的機制及其意義，為臨床防治腎病尋找新的治療靶點而提供理論基礎。
