《胸苷磷酸化酶-SIX1正反饋環，促進胃癌淋巴轉移的新機制》是依託華中科技大學，由黃柳擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：胸苷磷酸化酶-SIX1正反饋環，促進胃癌淋巴轉移的新機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：黃柳
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
淋巴轉移(LM)顯著影響胃癌預後。大樣本臨床研究證實胸苷磷酸化酶(TP)與胃癌LM密切相關，但其促LM的機制不明。SIX1是促LM的重要轉錄因子。我們前期發現TP與人胃癌LM程度、腫瘤淋巴管密度及SIX1表達正相關，同時高表達TP與SIX1的患者生存時間進一步縮短。故我們推測TP與SIX1可能協同促進胃癌LM並影響其預後。目前我們已發現TP過表達質粒轉染胃癌細胞後SIX1表達增加；TP可激活SMAD的上游通路之一PI3K-AKT；SMAD與SIX1共同調控VEGF-C，促進淋巴管新生與轉移；經預測SIX1可與TP啟動子區結合。本項目擬驗證TP-SIX1共表達與胃癌預後的相關性，探索TP是否通過PI3K-AKT-SMAD通路激活SIX1，SIX1是否刺激TP過表達，並初步探討靶向TP-SIX1正反饋環在抑制胃癌LM中發揮的作用。本研究有助於闡明胃癌LM的新機制，為抗胃癌轉移新藥研發提供線索。
結題摘要
淋巴轉移(LM)顯著影響胃癌預後。大樣本臨床研究證實胸苷磷酸化酶(TYMP)與胃癌LM密切相關，但其促LM的機制不明。SIX1是促LM的重要轉錄因子。我們對TYMP促進胃癌淋巴轉移的機制進行了初步探討。我們研究了674例胃腺癌根治術後的患者，驗證了胃癌組織TYMP高表達與人胃癌淋巴結轉移數目，淋巴結轉移比例，N分期正相關，且TYMP陽性患者與TYMP陰性患者相比，總體生存時間更短。免疫組化發現腫瘤組織中，TYMP表達與SIX1表達以及VEGFc正相關，TYMP表達與ki67正相關，SIX1表達與ki67無明顯相關性。我們還發現，同時高表達TYMP與SIX1的患者生存時間進一步縮短。為了驗證TYMP與SIX1是否存在協同促進胃癌LM並影響其預後，我們成功構建過表達TYMP和過表達SIX1的慢病毒載體，轉染MKN-45胃癌細胞，構建TYMP過表達細胞系MKN-45/TYMP、SIX1過表達細胞系MKN-45/SIX1、雙質粒轉染構建 TYMP和 SIX 共表達細胞系 MKN-45/ TYMP+SIX1。我們發現MKN-45/TYMP，MKN-45/SIX1，及MKN-45/ TYMP+SIX1細胞的VEGF-C mRNA表達均有增加，MKN-45/TYMP+SIX1促進VEGF-C表達的能力優於MKN-45/TYMP，但並沒有發現 MKN-45/TYMP+SIX1促進VEGF-C表達的能力優於MKN-45/SIX1。過表達TYMP的細胞，SIX1表達增加，但SIX1過表達，並沒有增加TYMP的表達。本項目驗證了TYMP可能通過促進SIX1及VEGF-C表達，促進胃癌淋巴轉移，並影響患者預後。腫瘤組織TYMP與ki67正相關。TYMP-SIX1共表達的胃癌患者預後差。SIX1刺激TYMP過表達的依據不充分。後續我們將進一步探索TYMP是否通過PI3K-AKT-SMAD通路激活SIX1，並初步探討靶向TYMP及SIX1在抑制胃癌LM中發揮的作用。
