肝X受體調節載脂蛋白M的機制研究

《肝X受體調節載脂蛋白M的機制研究》是依託蘇州大學，由張曉膺擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：肝X受體調節載脂蛋白M的機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張曉膺
• 依託單位：蘇州大學

項目摘要

載脂蛋白M在調節脂質代謝，特別是在膽固醇的逆轉運中有著重要的作用，肝X受體(liver X receptor, LXR)是脂質代謝的核心調控者。我們前期的研究發現，LXR激動劑T0901317在肝細胞中具有下調apoM表達的作用，且呈劑量依賴性，提示apoM可能是LXR的新的靶基因。有意思的是，Calayir等在肯定了我們的結果的同時，發現在腸上皮來源的腫瘤細胞中LXR的激活能上調apoM的表達。在本研究中，我們擬採用基因轉染並結合生物信息手段來研究LXR是直接還是間接調節apoM的表達，如果是間接調控我們將進一步採用共轉染和siRNA干擾技術找到調控的中介分子，尋找LXR在肝細胞和腸上皮來源的細胞中對apoM不同調節作用的合理解釋，為了解apoM的調控機制提供初步的實驗依據。

結題摘要

ApoM 作為新近被發現的載脂蛋白，其調控機制尚未闡明。我們前期的研究結果顯示，瘦素、胰島素、高血糖以及許多細胞因子在體內外都能調節ApoM的表達，ApoM基因的表達也受肝核因子1（Hepatocyte nuclear factor-1, HNF-1）調節，最新的研究結果提示ApoM基因也是LXR的靶基因，但其調節機制尚不明了。本項目套用Dot-blotting、實時定量PCR技術檢測實驗動物，肝癌細胞株（HepG2），結腸癌細胞株（Caco2）研究肝X受體激動劑、拮抗劑以及一些核受體配體對ApoM及相關信號分子的影響，以期初步明確LXR在體內外調節apoM表達的機制。項目取得成果如下：(1)成功構建了LXR調節ApoM的動物和細胞模型，通過體內外實驗研究表明，LXR激動劑TO901317及RXR配體9-順RA以劑量依賴方式，通過LXR/RXR途徑下調ApoM表達，提示ApoM是新的LXR靶基因，這些成果為深入研究脂質代謝開闢了一條有意義的途徑。 (2)初步闡明了ABCA1可能通過直接作用於ApoM基因上游調控序列升高ApoM的表達。而並不通過LRH-1這條途徑間接調控ApoM的表達。(3)TO901317同時通過LXR和FXR兩條途徑影響Caco2細胞ApoM的表達。FXR/SHP/LRH1這條轉錄調控途徑在肝細胞及腸上皮細胞中都存在而且起作用，但調節的方向正好相反，結果導致TO901317處理肝來源細胞和腸上皮來源細胞時ApoM 表達水平不一樣。這些研究成果將為更好地明確LXR在體內外調節apoM表達的機制提供實驗依據。