肝臟跨膜蛋白TMEM2影響B肝病毒感染細胞的機制研究

《肝臟跨膜蛋白TMEM2影響B肝病毒感染細胞的機制研究》是依託中山大學，由彭亮擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：肝臟跨膜蛋白TMEM2影響B肝病毒感染細胞的機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：彭亮
• 依託單位：中山大學

中文摘要

B型肝炎嚴重危害人類健康，但其發病機理尚未完全闡明，尤其是其起源：B肝病毒（HBV）感染細胞的具體過程與機制均不明確。本項目在本課題組前期關於慢性B肝的遺傳機制與差異蛋白組學的研究基礎上，繼續深入研究肝臟跨膜蛋白TMEM2在HBV感染細胞過程中的作用及其機制。本項目使用慢病毒轉染及過表達、基因干擾、免疫共沉澱等成熟技術，首先調節TMEM2在細胞中的表達後比較HBV感染狀態的變化以明確其與HBV感染的關係，接著研究TMEM2與鈉離子-牛磺膽酸共轉運多肽（NTCP，最新研究成果證明其為HBV感染的功能性受體）可能存在的競爭或拮抗關係，最後探索它們與NF-kappaB信號轉導系統在HBV感染過程中的作用及相互影響，並試圖最終闡明TMEM2在HBV感染細胞過程中的機制，為最終明確HBV感染機制提供研究基礎和新的研究途徑。

結題摘要

B型肝炎病毒感染嚴重危害人類健康，我們採用“慢病毒轉染及過表達”、“基因干擾”、“免疫共沉澱”等成熟技術探索抑制HBV感染的新途徑。本課題研究自2014年1月1日開始，2017年12月31日結束，完成課題任務並達到預期目標。觀察到TMEM2表達水平的差異確實能影響HBV的感染，即觀察到各組細胞感染B肝病毒後HBsAg、HBcAg、HBV DNA及ccc DNA的表達情況與細胞內TMEM2的表達量呈負相關的聯繫。進一步分析提示細胞內TMEM2表達的高低是與細胞內JAK-STAT信號通路相關分子的表達量相關的，即在干擾TMEM2表達的細胞系內p-JAK1、p-STAT1的表達量是降低的，然而在過表達TMEM2細胞系內p-JAK1、p-STAT1的表達量是升高的。更深入的分析提示TMEM2對於IRF9的核轉位以及MxA、OAS1的表達量存在影響。我們的研究提示在肝癌細胞系（HepG2細胞系和HepG2.2.15細胞系）中TMEM2對HBV感染的負性調控作用是通過JAK-STAT信號轉導通路來實現的。 同時，本項目經過2年的對於“TMEM”與“牛磺膽酸鹽鈉協同轉運多肽（NTCP）”及其相關基因變異的關係研究，發現NTCP的變異（p.Ser267Phe）和人群對B型肝炎病毒的易感性下降有關，並且與慢加急性肝衰竭的發生率降低具有相關性。該結果首次從人體內的角度上提供了NTCP是HBV受體的依據。然而，在上述研究中發現在1899例慢B肝患者中存在5例p.Ser267Phe純合子突變患者，這提示B肝病毒的受體有可能不僅限於NTCP一種，TMEM2對HBV感染的影響作用是否類似於NTCP，或者存在更深入的未知機制，我們對TMEM2更深入的研究將有可能幫助回答上述問題。 整個課題研究過程中，本基金共資助發表3篇SCI收錄論文，指導博士研究生（朱翔）1名，並且本項目組成員朱翔於2017年獲得國家自然科學基金青年基金項目資助1項（81700527，跨膜蛋白TMEM2通過IL-6和IL-32抑制B型肝炎病毒感染的轉錄組學機制研究 ），這是對本項目科學問題的更加深入的研究。