《肝癌發生髮展中唾液糖蛋白糖鏈標誌物的篩選和鑑定》是依託西北大學，由李錚擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：肝癌發生髮展中唾液糖蛋白糖鏈標誌物的篩選和鑑定
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李錚
- 依託單位：西北大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肝癌死亡率高的原因之一是肝癌的確診通常是在晚期，錯過了最佳的治療時期，病理組織學檢查仍是目前診斷的金標準。因此尋求非損傷性檢查，進行肝癌早期診斷，是防控肝癌的關鍵。目前的研究工作表明在肝病的炎症、纖維化、癌變的過程中患者血清和肝組織中均伴有糖蛋白糖鏈結構的改變，但在患者的唾液中是否存在類似的糖鏈結構變化尚不清楚，是亟待研究的問題。本項目擬以B型肝炎、B肝後肝硬化和肝癌患者以及健康志願者的唾液樣本為研究對象，利用糖組學技術分析臨床患者與正常對照樣本中的糖蛋白糖鏈譜，篩選和鑑定B肝、肝硬化和肝癌患者唾液中共有的和特有的糖蛋白糖鏈，研究唾液糖蛋白糖鏈變化與肝癌發生髮展的關聯性。確定敏感性高、特異性強和重現性好的糖蛋白糖鏈為潛在的肝癌診斷標誌物。本研究將為鑑別診斷肝炎、肝硬化與肝癌，尤其為非損傷性肝癌早期臨床診斷提供理論依據。
結題摘要
本課題以B型肝炎、B肝後肝硬化和肝癌患者以及健康志願者的唾液樣本為研究對象，分析臨床患者與健康對照樣本的糖蛋白糖鏈譜，篩選並鑑定B肝、肝硬化和肝癌患者唾液中共有及特有的糖蛋白糖鏈，研究唾液糖蛋白糖鏈變化與肝癌發生髮展的關聯性，並確定敏感性高、特異性強和重現性好的糖蛋白糖鏈作為潛在的肝癌早期診斷標誌物。在獲得國家自然科學基金的資助後，本課題按計畫實施，進展順利，於不同階段分別完成了臨床樣本採集；利用高覆蓋率凝集素晶片技術對健康志願者、B型肝炎、肝硬化和肝癌患者的唾液糖鍊表達差異進行了研究，經過個例唾液樣本的凝集晶片進一步篩選，有14種凝集素（例如MAL-II, UEA-I 和 LTL）識別的糖鏈結構在健康志願者、B肝、肝硬化及肝癌患者之間存在顯著差異，主成分分析顯示B肝、B肝後肝硬化和肝癌患者唾液中，三者各自具有特異性糖蛋白糖鏈譜，而且肝硬化和肝癌患者糖鏈譜有重疊區，可用於肝癌的早期診斷。基於篩選出的14個凝集素，製備了B肝相關肝硬化和肝癌鑑別診斷小型凝集素晶片，分別構建了B肝、肝硬化和早期肝癌診斷數學模型，鑑別B肝的靈敏度及特異性達到0.96和0.90，肝硬化的靈敏度及特異性達到0.94和0.82，肝癌的靈敏度和特異性達到0.94和0.84。經臨床驗證，具有良好的診斷效果。為驗證該模型針對於診斷B肝、肝硬化、肝癌的特異性，我們利用凝集素晶片對胃癌、乳腺癌、卵巢癌等典型癌症患者的唾液糖鍊表達差異進行了篩選驗證，分析並建立了對應診斷模型，驗證了B肝、肝硬化、肝癌診斷模型的特異性。在此基礎上，通過製備一系列凝集素（MAL-II、SNA、PHA-E+L、LTL、DSA）磁性微粒複合體，對B肝、肝硬化、肝癌患者及健康志願者唾液中對應糖蛋白進行分離純化並獲取對應糖鏈，利用MALDI-TOF/TOF-MS技術對糖鏈進行分析，鑑定獲得B肝、肝硬化和肝癌患者唾液中共有及特有的糖蛋白糖鏈，這些特殊表達於肝癌、肝硬化患者唾液中的糖鏈，均具有成為診斷對應肝病的生物標誌物的潛力。
