肉蓯蓉苯乙醇苷的提取、純化和抗氧化活性研究

論文摘要

肉蓯蓉為列當科肉蓯蓉屬多年生寄生植物。荒漠肉蓯蓉(Cistanche deserticola Y. C.Ma)是中國傳統中藥,被《中國藥典》收載,具有補腎陽、益精血、潤腸通便等功效。苯乙醇苷是肉蓯蓉的主要的活性成分,具有抗氧化、保護神經、護肝、增強記憶力、抗疲勞、改善衰老等藥理活性。為提高肉蓯蓉資源利用率,開發高附加值產品,促進產業化發展,本論文以生物煉製為思路,研究了適合工業化放大的超聲輔助提取、大孔吸附樹脂純化等方法,對肉蓯蓉中苯乙醇苷進行分離純化。主要研究結果如下：1、建立了苯乙醇苷的檢測方法。以紫外分光光度法快速檢測總苯乙醇苷,以HPLC法準確測定松果菊苷和毛蕊花糖苷。2、在單因素實驗的基礎上,採用中心複合試驗設計回響面分析法,最佳化了肉蓯蓉苯乙醇苷的超聲輔助提取工藝。最優提取工藝為：乙醇濃度52%,提取溫度65℃,提取時間46min,此條件下松果菊苷與毛蕊花糖苷提取得率之和為17.02±0.11mg/g,與理論值相對誤差為0.50%。該提取得率高於索氏提取法和高溫回流提取法。中試放大實驗的提取率略高於小試,超聲輔助提取適合於肉蓯蓉苯乙醇苷的提取。3、採用大孔樹脂純化肉蓯蓉苯乙醇苷提取物,並研究其吸附特性。對8種不同極性及不同型號的大孔吸附樹脂進行了考察,從中篩選出了最為合適的HPD300型樹脂。研究了HPD300型樹脂對苯乙醇苷的吸附特性,松果菊苷和毛蕊花糖苷存在競爭吸附現象。對純化工藝進行了較為系統的研究,最適宜上樣濃度為松果菊苷2.0mg/mL,毛蕊花糖苷1.6mg/mL,上樣速度為1BV/h,上樣量5BV。洗脫時洗脫劑乙醇的最適宜體積分數與洗脫速度分別為50%和2BV/h。冷凍乾燥後所得粉末中松果菊苷質量分數為16.66%,回收率為80.41%；毛蕊花糖苷質量分數為15.17%,回收率為90.17%。所得純化物中總苯乙醇苷質量分數為76.58%。4、對苯乙醇苷粗提物和純化物的抗氧化活性進行了考察。與粗提物相比,純化物具有顯著的DPPH自由基清除能力和較強的還原力。選用H202損傷SH-SY5Y神經細胞,建立了細胞氧化損傷模型,表現為細胞存活率下降。低濃度的苯乙醇苷粗提物和純化物都能有效地降低H202對該細胞的損傷,減少細胞的死亡率,其中0.1gg/mL純化物效果最好。

引文結構

劉伯言. 肉蓯蓉苯乙醇苷的提取、純化和抗氧化活性研究[D].北京林業大學,2014.

肉蓯蓉苯乙醇苷的提取、純化和抗氧化活性研究

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