試樣中的維生素C用偏磷酸提取後,經2,6-二氯靛酚氧化成脫氫維生素C,與鄰苯二胺反應,生成具有紫藍色螢光的喹(口惡)啉衍生物。在激發波長350nm,螢光波長430nm處測定其螢光強度。
基本介紹
- 中文名：肉與肉製品：維生素C含量測定
- 外文名：Meat and meat products: determination of vitamin C content
- 標準類型：國家標準
- 國標號：GB/T 9695.29-2008
- 提出單位： 中華人民共和國商業部
- 起草單位：中國肉類食品研究中心
- 出版社：中國標準出版社
原理,試劑,儀器與設備,試樣,分析步驟,提取,測定,
原理
試樣中的維生素C用偏磷酸提取後,經2,6-二氯靛酚氧化成脫氫維生素C,與鄰苯二胺反應,生成具有紫藍色螢光的喹(口惡)啉衍生物。在激發波長350nm,螢光波長430nm處測定其螢光強度采淋精格。
試劑
抗壞血酸己祖紋標準溶液：1mg/mL
精確稱取抗壞血酸50mg,用5%偏磷酸溶液溶解並定容到50mL棕色容量瓶中。測定時再稀釋到25μg/mL。
偏磷酸：5%溶液。
乙酸鈉(GB 693):50%溶液。
硼酸(GB 628)-乙酸鈉溶液。
將3g硼酸滲設腿槓溶於50%乙酸鈉溶液中並稀釋到100mL。
95%乙醇(GB 678):50%溶液。
硫脲：3%溶液。
將3g硫脲溶於50%乙醇溶液中並稀釋到100mL(臨用前配製)。
鹽酸鄰苯二胺：0.02%溶液。
2,6-二氯靛酚:0.2%溶液才嬸頁。
儀器與設備
實驗室常規微格戶設備;
絞肉機:孔徑不超過4mm。
試樣
按GB 9695.19取樣;
取有代表性的試樣200g,於絞肉機廈虹中至阿去墊少絞兩次並使其混勻,在密閉容器中於4℃下貯存備用。
分析步驟
提取
稱取試樣2～5g(精確至0.001g)置於燒杯中,加入20mL50%偏磷酸溶液,充分攪拌後,全部移入100mL容量瓶中並定容。混勻後過濾，濾液備用。
測定
分別取濾液1mL加入2支試管中,取標準抗壞血酸溶液(25μg/mL)1mL分別加入另外2支試管,向各管中加入2,6-二氯靛酚溶液0.1mL,充分混勻,此時溶液呈微紅色,再加入硫脲溶液0.1mL搖勻,使過量的2,6-二氯靛酚還原(粉紅色剛剛褪去)。取試樣管、標準管各1支分別加入乙酸鈉溶液1mL;另2支為空白管,分別加入硼酸—乙酸鈉溶液1mL搖勻。在室溫下放置15min,分別加入鹽酸鄰苯二胺溶液5mL搖勻後在暗處放置35min。以激發波長350nm,發射波長430nm,測定生成物的螢光強度。
