《肉種雞鋅營養影響子代肉雞腸黏膜免疫的表遺傳機制》是依託中國農業大學，由咼於明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：肉種雞鋅營養影響子代肉雞腸黏膜免疫的表遺傳機制
- 依託單位：中國農業大學
- 項目負責人：咼於明
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
新生雛雞免疫系統發育不完善，免疫抗病機能低下，腸道疾病常見，飼料利用效率不佳，因此，有關早期營養促進免疫機能快速發育理論和技術的研究具有重要意義。在哺乳動物的研究表明，鋅指蛋白A20可通過抑制NF-κB信號通路來調節哺乳動物的腸黏膜免疫；母體攝入適量的微量元素鋅可降低子代對疾病的易感性；母體營養影響子代的免疫是通過胎兒的程式化反應或表觀遺傳重編程實現的。家禽屬卵生動物，與哺乳動物差異很大。本項目擬在肉種雞日糧中添加不同化合物（有機和無機）和不同劑量鋅，通過檢測子代肉雞小腸鋅指蛋白A20和NF-κB信號通路相關因子表達以及A20的DNA甲基化和組蛋白乙醯化水平，同時探討不同鋅營養水平日糧對來源於不同鋅營養狀態種雞的子代肉雞的腸黏膜免疫機能的調節作用，並進行體外腸上皮原代細胞培養試驗，揭示鋅營養是否通過A20發揮免疫調節作用及其表遺傳機制，並比較有機鋅和無機鋅的營養作用。
結題摘要
畜禽腸道免疫機能與腸道健康的營養調節理論和技術措施對於安全高效養殖生產至關重要。本項目研究了一種重要的畜禽免疫機能調節營養素微量元素鋅通過種雞調節子代早期腸道免疫和腸道健康的作用以及分子生物學機制。首先探討了45周齡Ross 308種母雞日糧中添加有機鋅對子代肉雞全身免疫以及腸黏膜免疫機能的影響，種雞日糧充足鋅營養可升高新生子代血清IgY、IgA、NDV和IBDV抗體的濃度以及14日齡時外周血單核細胞的LPS刺激指數，有機鋅比無機鋅具有更顯著的改善效果；還可改善子代肉雞的空腸形態，增加sIgA的分泌，提高黏蛋白Mucin 2和鋅指蛋白A20的表達、抑制NFκB p65、TNF-α、IL-1β的轉錄，同時上調PCNA的蛋白表達，下調Caspase 3的蛋白表達，降低A20啟動子區域的DNA甲基化但增加了組蛋白H3K9的乙醯化水平，增強了子代肉雞的腸黏膜免疫機能。其次，在子代肉雞15日齡時對其腹腔注射LPS，上調脾臟和空腸IL-8、IL-1β、TNF-α、NF-κB p65和A20的mRNA水平；肉種雞日糧添加有機鋅顯著抑制LPS誘導的脾臟和空腸NF-κB p65的轉錄以及炎性細胞因子的基因表達；子代肉雞在LPS攻毒後腸道上皮完整性變差、屏障通透性變大，肉種雞日糧中添加100 mg/kg的無機鋅或有機鋅可顯著緩解子代肉雞在LPS攻毒後的腸道屏障功能損傷，有機鋅組改善腸道屏障功能的效果好於無機鋅組。第三，通過對雞原代腸上皮細胞進行體外培養，套用RNA干擾A20基因沉默技術研究發現，腸上皮細胞感染A20基因RNA干擾病毒後，A20的蛋白表達顯著下調，IL-1β、IL-8、TNF-α的基因表達和蛋白分泌顯著升高，同時加劇LPS誘導的IL-8、IL-1β的轉錄上調和IL-1β、TNF-α的蛋白分泌增加；補鋅並不能改善由於A20基因沉默導致的胞漿中A20、NF-κB p65蛋白表達下調和胞漿中P-NF-κB p65、P-IκBα蛋白表達上調以及胞核中P-NF-κB p65的蛋白表達升高。套用A20基因過表達技術，A20腺病毒感染腸上皮細胞極顯著提高A20的基因表達，極顯著降低IL-1β、IL-8和TLR4的基因表達;補鋅可顯著降低IL-1β的表達量，顯著提高NF-κB p65的表達量。揭示了鋅通過A20-NF-κB p65信號通路緩解LPS誘導的雞腸上皮細胞炎症反應的機制。
