《聚集素在阿爾茨海默病早期診斷中的套用及機制初探》是依託復旦大學，由趙倩華擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：聚集素在阿爾茨海默病早期診斷中的套用及機制初探
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：趙倩華
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本研究圍繞聚集素蛋白，從臨床研究和基礎實驗評價血漿聚集素在阿爾茨海默病早期診斷中的價值。從前期佇列研究中產生的病例中選取遺忘型輕度認知損害患者150例及認知正常老人150例，完成標準化信息採集、神經心理測驗及血標本留取，縱向隨訪，定期檢測血漿聚集素水平，揭示AD型MCI階段聚集素動態演變規律；體外實驗以Aβ單體及寡聚體對原代培養的海馬神經元進行干預，觀察Aβ對聚集素的上調作用。通過PI3K特異性抑制劑干預，探索Aβ對聚集素的上調機制；體內實驗，合成聚集素小干擾RNA，分別干預PS1/APP轉基因小鼠和野生型小鼠，觀察Aβ與聚集素的後續改變，分析二者之間的因果關聯。本研究的前瞻性設計可為聚集素作為AD早期診斷標誌的評價提供最直接的證據；對於進一步探索AD發病機制、快速高效識別AD型MCI從而制定恰當的治療方案有重要的理論及實踐意義。
結題摘要
聚集素（Clusterin）與阿爾茨海默病的相關性近年來備受關注，前者可通過炎性機制、脂質調節、抑制神經元凋亡和促進神經發生等多種途徑也參與致病。對其與Aβ 相互作用的研究已成為炙手可熱的話題。基於前人研究，我們推論：Aβ 作為AD的主要致病元兇，能觸發聚集素表達，聚集素作為Aβ應激蛋白，在AD的發病及進展過程中不斷受Aβ刺激表達，並參與Aβ的聚集與清除。為驗證這一假設，本研究分別從體內、外水平進行基礎實驗探索，並進一步在人群中進行驗證。在原代培養海馬神經元細胞中，Aβ1-42單體及寡聚體均能不同程度地上調原代神經元聚集素的mRNA和胞內蛋白水平的表達。通過觀察APP/PSEN1 雙轉基因小鼠腦內Aβ的沉積及行為學表現，並分析其腦內及外周血中聚集素表達，發現APP/PSEN1小鼠的空間學習和記憶能力顯著差於同齡WT小鼠，APP/PSEN1小鼠腦內Aβ及聚集素水平均隨增齡而增高，均顯著高於同齡野生型小鼠（p <0.05）。但外周血聚集素濃度與同齡野生型小鼠的無明顯差異（p>0.05）。雄鼠外周血聚集素水平均明顯高於同齡雌鼠（p<0.05）。結合細胞實驗，在體驗證了Aβ可促進胞內型聚集素的表達。最後，本研究收集76例認知障礙患者的腦脊液及外周血清，套用ELISA法測定腦脊液及血清中Aβ1-42 和聚集素水平，進行相關分析。另納入125 例阿爾茨海默病、124 例遺忘型輕度認知損害及116 例認知正常者的臨床資料及外周血，比較三組血清聚集素差異。發現認知障礙患者腦脊液Aβ1-42與聚集素呈正相關（p<0.05），但與外周血聚集素無關聯。三組間血清clusterin水平無顯著性差異。可見中樞聚集素與認知障礙有一定關聯，但外周血聚集素尚不足以作為阿爾茨海默病的診斷標誌物。
