《耐輻射球菌DrRRA在極端電離輻射抗性中的作用機制研究》是依託浙江大學，由王梁燕擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：耐輻射球菌DrRRA在極端電離輻射抗性中的作用機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：王梁燕
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
反應調節蛋白是雙組分系統的一個重要組分，在原核生物信號轉導途徑中起重要作用。在前期研究中，我們發現了一個與耐輻射球菌極端電離輻射抗性相關的反應調節蛋白（DrRRA），其基因突變株對電離輻射等DNA損傷介質非常敏感，但具體的作用機制還不清楚。本項目擬通過建立組氨酸激酶和反應調節蛋白之間的體外磷酸轉移體系，來確立與該反應調節蛋白耦聯的伴侶組氨酸激酶；運用基因組學和蛋白組學方法以及基因組SELEX技術，結合實時定量PCR和體外凝膠遷移實驗來鑑定受該反應調節蛋白直接調控的下游靶基因並研究其功能；運用酵母雙雜交、串聯親和純化及免疫共沉澱方法鑑定該反應調節蛋白的互作蛋白和蛋白複合體，並研究互作蛋白對DrRRA生物學功能的影響。通過本研究闡明反應調節蛋白DrRRA起作用的分子機制，加深對極端微生物環境適應機制的認識，並為該蛋白在放射線污染區和腫瘤放療中的開發利用奠定基礎。
結題摘要
耐輻射球菌是能夠忍受強烈電離輻射和強氧化劑等極端環境的微生物，其超強的外界脅迫抗性主要源於高效的DNA損傷修復機制和抗氧化保護作用。本項目利用生物信息學、基因組學、蛋白組學、基因突變技術、生物化學等方法研究了與極端抗性相關的一個重要反應調節蛋白DrRRA，篩選並鑑定了直接受其調控的重要DNA損傷反應蛋白DdrI並發現該蛋白在信號轉導、新陳代謝和能量轉運中具重要作用，同時研究了DrRRA與其它重要調控蛋白如PprI之間的關係，發現PprI和DrRRA在胞內起協同作用，且PprI部分調控DrRRA的表達，進一步明確了DrRRA網路調控機制。當耐輻射球菌面臨強大電離輻射時，DrRRA通過啟動或加強脅迫反應蛋白表達、調控胞內能量和代謝相關基因表達。同時研究了一些重要抗性相關蛋白如DR0199、DR2539和DRB0067，證明了它們共同抵禦外界脅迫。研究結果揭示了反應調節蛋白及其相關蛋白在極端微生物抗性中起作用的分子機制，加深了對極端微生物環境適應機制的認識。
