《繭蜂病毒關閉hemichannel誘導凋亡小體形成的機理研究》是羅開珺為項目負責人，雲南大學為依託單位的面上項目。
基本介紹
- 中文名：繭蜂病毒關閉hemichannel誘導凋亡小體形成的機理研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：羅開珺
- 依託單位：雲南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
昆蟲免疫反應的信號傳導途徑，是當今害蟲生物防治領域尋求新突破的焦點。Hemichannel（HC）關閉是新發現的凋亡細胞的免疫反應，對減少凋亡信號的傳導，保護生物有機體的正常生命活動有著重要的生理學意義。最新的研究發現，繭蜂病毒促進HC關閉並誘導凋亡小體形成的過程與病毒調控組成HC的Innexin（Inx）蛋白有關，但其詳盡機理尚不清楚。本項目擬通過對Inx蛋白的調控與凋亡細胞解體相關性的研究，揭示繭蜂病毒關閉HC促進凋亡小體形成的機理。具體研究包括：（1）病毒調控Inx關閉凋亡細胞表面的HC； （2）病毒調控Inx關閉凋亡小泡的HC；（3）病毒調控Inx促進凋亡小泡解體形成凋亡小體。研究將採用Time Lapse全程監控凋亡小體的形成過程，結合細胞生物學等研究方法進行實驗驗證。研究結果將為闡明Hemichannel關閉，阻斷物質信號傳遞這個新的細胞免疫反應提供新的實驗及理論依據。
結題摘要
雙斑側溝繭蜂病毒能夠抑制寄主的免疫反應。在前期的研究中發現: 繭蜂病毒誘導細胞凋亡，凋亡的細胞最終形成凋亡小體；而Innexin-hemichannel（Inx-HC）的關閉與凋亡小體的形成相關。本研究項目在此基礎上，把研究聚焦在繭蜂病毒關閉Inx-HC：（1）如何調控凋亡小體；（2）如何調控凋亡小泡。研究通過繭蜂病毒對Inx的DNA、mRNA轉錄、蛋白翻譯三個水平的調控，解析其作用機理。獲得以下重要的研究結果：（1）繭蜂病毒整合進寄主細胞的基因組，導致Inx1和Inx4的mRNA轉錄受抑制進而抑制其蛋白的表達，同時，Inx2和Inx3的mRNA和蛋白水平也被顯著的下調； （2）病毒Vank蛋白與轉錄因子Dip3的相互作用，抑制了下游基因Inx2和翻譯起始因子eIF4E和eIF4A的轉錄進而降低了蛋白水平的表達。上述結果表明，繭蜂病毒同時調控多個Inxs促進了凋亡細胞形成凋亡小體。緊接著，對單個Inx蛋白在調控凋亡小體形成的功能研究中表明：Inxs是Caspase3的底物，其直接被切割能促進細胞形成凋亡小體； 相反，通過切割Inx N-延長序列恢復其正常序列，導致凋亡小體的形成減少, 同時發現，關閉的HC開放。 最新的研究發現，HC關閉條件下，Inx C-端延長促進了凋亡細胞形成凋亡小泡，但並不能形成凋亡小體（未發表數據）。綜上所述，研究結果暗示，Inx-HC關閉的條件下，凋亡小體和凋亡小泡的形成有其獨特的信號途徑，其調控機制有待進一步的深入研究。Inx-HC關閉對減少凋亡信號的傳導，保護生物有機體的正常生命活動有著重要的生理學意義。
