《網狀蛋白-4家族與腎癌的關係及其分子機理研究》是依託四川大學，由張林擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：網狀蛋白-4家族與腎癌的關係及其分子機理研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張林
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腎癌是常見的泌尿系統腫瘤，其發病機制研究是該領域研究的難點和重點。網狀蛋白-4（Rtn-4）有Rtn-4A、B及C三個主要成員，經MAPK(JNK/SAPK、p38)、NF-κB信號通路，調控細胞凋亡。課題組前期研究發現Rtn-4基因3'-UTR區TATC插入/缺失多態性位點與腎癌相關，在小樣本腎癌患者中發現Rtn-4基因E250K，E278V及D288G三處新突變位點，腎癌組織中Rtn-4B mRNA表達增高，蛋白表達降低，受體NgBR mRNA表達降低，從多角度提示Rtn-4與腎癌密切相關。本研究擬從DNA遺傳變異、mRNA和蛋白表達、蛋白亞細胞定位等角度，全面深入研究Rtn-4家族與腎癌發生髮展的關係及分子機制、其作為腎癌標記物的可行性，採用質粒轉染、RNA干擾使靶基因高表達、失表達，研究其對腎癌細胞死亡/存活的影響及其信號通路，探索干預Rtn-4表達調控抑制腎癌發生髮展的新途徑。
結題摘要
腎癌是常見的泌尿系統腫瘤，其發病機制研究是該領域研究的難點和重點。基因突變與腫瘤發生髮展密切相關。本項目研究發現RTN4基因3’-UTR的TATC及CAA插入/缺失多態性位點與腎癌發病密切相關；RTN4基因mRNA和蛋白表達在癌組織和癌旁組織間有顯著性差異；採用DHPLC技術方法在腎癌患者組中篩查到RTN4基因E250K、E278V、D288G和M380T等四個新突變位點；構建了以pcDNA3.1(+)為載體的RTN4基因野生型（WT）、E250K、E278V、D288G及M380T突變型質粒，轉染ACHN細胞後篩選出相應的基因過表達穩轉株；採用CRISPR/Cas9技術構建了RTN4基因敲除/敲低ACHN細胞模型；E250K及E278V突變促進細胞增殖；WT組中AKT mRNA表達下調而蛋白表達上調、NF-κB和p38均上調；而E250K、E278V等突變顯著促進p38和NF-κB，抑制AKT。我們的研究結果表明，腎癌患者中新發現的E250K、E278V、D288G和M380T為功能性突變，通過p38 MAPK和NF-κB途徑，促進細胞增殖，從而參與腎癌發生髮展。
