《經鼻誘導Th3細胞活化負向調節動脈粥樣硬化機制研究》是依託華中科技大學，由曾秋棠擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：經鼻誘導Th3細胞活化負向調節動脈粥樣硬化機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：曾秋棠
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
通過黏膜誘導免疫耐受已成為研究和防治自身免疫性疾病和慢性炎症性疾病的重要策略。近年來，諸多學者指出動脈粥樣硬化（AS）是一種自身免疫性疾病。經黏膜給予免疫原可誘導免疫耐受、活化調節性T細胞、上調抗炎因子水平，繼而延緩AS的發生髮展。我們的臨床研究提示Th3細胞的升高可能促進了斑塊的穩定。Th3細胞是黏膜免疫耐受時誘導活化的最常見、最重要的一型調節性T細胞，我們近期的預實驗也表明低劑量oxLDL可以誘導活化Th3細胞。本課題將採用經鼻給予oxLDL誘導Th3細胞活化的方法，運用免疫學和分子生物學技術，研究Th3細胞對AS免疫炎症反應和斑塊發生髮展的影響及機制，深入探討誘導免疫耐受、Th3細胞和AS三者關係。上述研究的結果將有助於闡明AS免疫炎症反應的負向調控機制，以誘導免疫耐受和Th3細胞為靶點，拓寬冠心病一級預防和二級預防的思路。
結題摘要
此項研究中，首先，我們檢測免疫原ox-ldl對CD4+LAP+ Tregs的影響。將ApoE-/-小鼠分為PBS對照組（PBS組）和經鼻ox-ldl干預組（ox-ldl組），分離脾臟細胞後予ox-ldl刺激，結果表明：ox-ldl組脾臟細胞在ox-ldl刺激下，其增殖能力明顯弱於PBS組。於給藥後0、4、14天，流式檢測脾臟發現：CD4+LAP+ Tregs比例，尤其是CD4+CD25-LAP+ Tregs，隨時間逐漸上調，CD4 +CD25 +Foxp3 +結果類似。相反，效應性T細胞（Th1、Th2、Th17）卻明顯減少。分選脾臟CD4+ LAP+ Tregs，予ConA刺激後檢測結果表明：ox-ldl鼻飼可促進CD4+ LAP+ Tregs分泌TGF-β。其次，我們檢測ox-ldl或HSP鼻飼對動脈粥樣硬化發生髮展的影響。為研究ox-ldl對AS發生的影響，設定ox-ldl早期干預組和對照組；為研究ox-ldl對AS發展的影響，設定晚期干預組、對照組、強化組。結果表明：早期干預顯著減輕斑塊發生，同時，晚期干預可明顯抑制斑塊的發展，以強化組效果為佳。發現，ox-ldl鼻飼可明顯減少脾臟和動脈的MCP-1、 INF-γ、IL-4及IL-17表達，而增加抑炎因子TGF-β1表達。流式分析脾臟結果相似。另外，給予anti-TGF-β可抵消ox-ldl的保護作用，。在另一研究中，我們發現：給予HSP60鼻飼亦可抑制AS的發生，而對AS的發展並無明顯影響。HSP60鼻飼可明顯抑制小鼠體內IFN-γ的表達，而增加TGF-β1和IL-10的表達。流式分析脾臟結果相似。而給予anti-TGF-β可抵消HSP60的保護作用。在第三項研究中，我們探討胸腺基質淋巴細胞素（TSLP）在AS黏膜耐受中發揮的作用，結果表明：TSLP或TSLP-DCs可抑制AS的發展，並首次闡明了AS中TSLP、DC、TGF-β、Tregs之間的關係。 我們的研究表明：鼻飼HSP60/65或ox-ldl可誘導ApoE-/-小鼠CD4+LAP+ Tregs和CD4+CD25+Foxp3+Tregs生成，進一步促進TGF-β表達並抑制炎症反應，從而緩解動脈粥樣硬化的發生髮展。本研究闡明了鼻飼免疫原產生免疫耐受的機制，希望本研究為AS的預防或治療提供理論依據。
