《結腸癌中多梳蛋白SUZ12與抑癌因子WNT5A相互調控的研究》是依託華中科技大學，由陳鳳花擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：結腸癌中多梳蛋白SUZ12與抑癌因子WNT5A相互調控的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陳鳳花
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
結腸癌是最常見的人類惡性腫瘤之一，多梳家族(PcG)表達失調和WNT信號通路異常激活在其發生髮展過程中起著重要作用。本課題旨在揭示結腸癌中PcG蛋白SUZ12與抑癌因子WNT5A之間的相互調控機制，擬研究結腸癌組織中SUZ12表達與WNT5A基因甲基化之間的相關性、在結腸癌細胞沉默SUZ12對WNT5A基因甲基化的影響和過表達 WNT5A對SUZ12基因表達的影響，同時研究S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)抑制劑通過抑制轉甲基化反應而逆轉SUZ12對WNT5A轉錄的抑制作用以及DNA去甲基化藥物活化WNT5A表達以明確WNT5A通過β-catenin對SUZ12表達的調控。本課題從全新的角度探索結腸癌的發病機制，在多梳家族與WNT信號通路之間建立機制性聯繫，從表觀遺傳學角度為結腸癌尋找新的治療靶點和藥物，將是極具吸引力的研究領域。
結題摘要
結腸癌是最常見的人類惡性腫瘤之一，多梳家族(PcG)表達失調和WNT信號通路異常激活在其發生髮展過程中起著重要作用。PcG蛋白通過形成PcG抑制複合體（PRC）發揮作用，其中PRC2包括SUZ12和EZH2等。在本課題的研究過程中，我們發現PRC2成員SUZ12在大多數結腸癌組織中的表達水平明顯高於正常結腸黏膜組織，而WNT5A表達則與之相反，其在大多數結腸癌組織中的表達水平顯著低於相應正常結腸黏膜組織。我們成功構建了SUZ12 shRNA真核表達載體和pEGFP-N1-WNT5A過表達載體，並轉染結腸癌細胞系通過各種分子生物學技術闡明了在結腸癌細胞中沉默SUZ12可誘導E-Cadherin和WNT5A表達水平增高；過表達WNT5A可導致β-catenin和SUZ12表達水平降低。S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)抑制劑DZNep可下調結腸癌細胞中H3K27me3、SUZ12表達。DNA甲基化酶(DNMTs)抑制劑5-氮-2’-脫氧胞苷(5-Aza-CdR)作用於結腸癌細胞顯著上調WNT5A表達。另外，我們的研究還發現miRNA-101在結腸癌細胞中負調節EZH2表達，過表達miRNA-101可誘導pre-miRNA-101-1而非pre-miRNA-101-2表達，miRNA-101-1啟動子螢光素酶活性可被過表達miRNA-101或者knockdown EZH2上調，而被過表達EZH2下調，提示可能存在EZH2/miR-101-1相互負反饋迴路，進一步研究發現干預EZH2/miRNA-101-1反饋迴路發揮抗腫瘤活性。
