結核菌感染過程中性粒細胞CD13表達變化的影響和機制

《結核菌感染過程中性粒細胞CD13表達變化的影響和機制》是依託同濟大學，由馮永紅擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：結核菌感染過程中性粒細胞CD13表達變化的影響和機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：馮永紅
• 依託單位：同濟大學

中文摘要

中性粒細胞在結核病發病過程的作用目前還存在爭論。本課題前期對中性粒細胞近十種表面分子標誌的篩選結果表明，活動性結核病人中性粒細胞表面CD13的表達及血清氨肽酶活性均較正常對照組顯著而持續地降低。在此基礎上，本項目將進一步研究結核菌感染過程CD13/APN的表達變化，採用免疫組化等方法研究 CD13在結核肉芽腫組織的表達和細胞學定位、與其它免疫調節因子和結核菌特異性抗原分泌的關係；採用NB4細胞模型結合活動性結核病人免疫細胞因子分泌平衡的變化分析誘導中性粒細胞CD13表達下降的分子信號機制。進一步，結合體外細胞模型和臨床標本分析低表達CD13的中性粒細胞吞噬、NETs形成、凋亡功能的變化，以及對巨噬細胞分化、殺菌功能和Th1/Th2免疫平衡的影響。本研究結果將有助於對中性粒細胞在結核病發病過程中作用和結核菌免疫逃避機理的進一步了解，從而為合理的抗結核疫苗和治療方案的制定、治療效果評價提供參考

結題摘要

活動性結核病人吞噬細胞的功能分化及結核病免疫病理髮生的機制尚不完全清楚。在項目資助下，我們對活動性結核病人外周血中性粒細胞的表型及在炎性刺激下中性粒細胞呼吸爆發功能的變化進行了研究；就CD13表達活化對中性粒細胞呼吸爆發功能及吞噬結核菌作用的影響進行了探討，對影響中性粒細胞CD13表達的分子機制進行了初步探討。我們研究發現，儘管活動性結核病人外周血中性粒細胞數目較健康對照組無明顯差異，但病人中性粒細胞處於預活化狀態，表現為自發性的呼吸爆發自由基產生，自發性凋亡增加、中性粒細胞-血小板複合物增加，與吞噬相關的分子CD64表達上調等。CD13受體活化能促進致炎肽fMLP及大腸桿菌誘導的中性粒細胞呼吸爆發。在炎性刺激下，結核病人中性粒細胞的呼吸爆發功能下降，在糖尿病合併結核病人尤其明顯，可能與糖尿病合併結核病人中性粒細胞CD13分子表達下調有關。RNAi實驗表明，CD13表達下調引起中性粒細胞與凋亡相關的分子CD95，CD120b表達增加，中性粒細胞吞噬分枝桿菌BCG的功能降低，同時用CD13抗體WM15處理過的單核-巨噬細胞吞噬BCG的能力也降低，證實CD13參與分枝桿菌吞噬過程。 多核巨細胞形成是結核病理髮生的一個特徵性標誌。我們還研究了血小板對泡沫樣多核巨細胞的形成的影響。體外實驗結果提示血小板能誘導單核細胞分化為泡沫樣多核巨細胞，在結核菌感染下表現免疫抑制表型，免疫組化實驗結果表明肉芽腫多核巨細胞表達血小板特異性CD42b分子，結核病人肺泡灌洗液高表達CXCL5，與體外血小板誘導的泡沫樣多核巨細胞表達CXCL5一致。我們的研究第一次報導了血小板在結核病理髮生中的可能作用，為結核防治提供了新的思路。 糖尿病合併結核病是目前公共衛生的極大挑戰，項目還對糖尿病合併結核病人肉芽腫病理特徵進行了比較分析，發現糖尿病合併結核病人肉芽腫外纖維包裹明顯增加，乾酪樣壞死面積加大，與病人血糖控制水平有一定相關性。影像學CT觀察發現DM-TB組病人厚壁空洞增加，與在顯微鏡觀察下的結果一致。Multiplex研究肺泡灌洗液也表明，糖尿病合併結核病人灌洗液中促纖維化因子的增加更為明顯，提示控制血糖和抗纖維化治療可能有利於縮短糖尿病合併結核患者治療時間、增強療效，減少耐藥發生。