《結外NK/T細胞淋巴瘤-鼻型異常MicroRNA表達及作用機制研究》是依託北京大學，由李挺擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：結外NK/T細胞淋巴瘤-鼻型異常MicroRNA表達及作用機制研究
- 項目負責人：李挺
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
結外NK/T細胞淋巴瘤-鼻型（EN-NK/T-NT）是我國多發並具高度侵襲性的淋巴瘤。本研究組多年來在對該腫瘤細胞增殖和分化規律等分子遺傳學基礎，及重要基因突變和表達與其生物學特性的相關研究中有重要積累和發現。新近採用Real-time PCR對EN-NK/T-NT典型病例進行miRNA表達譜分析，顯示數種miRNA顯著升高或降低。本研究擬運用real-time PCR、基因重組轉染、Western blot及組織原位基因表達等技術分析這些異常表達的miRNA及在EN-NK/T-NT中的特異性，與腫瘤細胞譜系來源及分化的關係；確定針對該腫瘤細胞增殖,分泌細胞毒分子及誘導腫瘤間質改變等方面具有顯著調節作用的miRNA；並分析相關miRNA表達與EN-NK/T-NT腫瘤侵襲性及臨床生物學特性的關係，為進一步揭示該腫瘤高度侵襲性的生物學特性分子機制提供新的證據。
結題摘要
本研究旨在通過多種分子生物學技術探討在結外NK/T細胞淋巴瘤，鼻型（EN-NT/T-NT）中異常表達的miRNA及相關重要靶基因，及其與腫瘤發生髮展及預後的相關性，旨在揭示EN-NT/T-NT腫瘤分子生物學基礎，為臨床診斷和治療提供新依據。本研究首先採用Real-time PCR對EN-NT/T-NT的典型病例進行miRNA表達譜分析，篩選出8種異常表達的miRNAs；套用Real-time PCR及組織原位雜交表達技術分析該8種異常表達的miRNA在15例典型EN-NT/T-NT中的表達特異性，結果顯示miR-223和miR-886-3p的表達在EN-NT/T-NT中呈特異性上調。靶基因預測結果提示腫瘤抑制性轉錄因子PRDM1為miR-223的靶基因，進一步通過免疫組化及Western blot技術證實miR-223與PRDM1蛋白在61例EN-NT/T-NT組織及4種NK腫瘤細胞系中表達呈明顯負相關，套用雙螢光素酶報告基因檢測方法基因重組轉染技術分別在腫瘤組織及腫瘤細胞系中證實了miR-223在轉錄後水平抑制PRDM1蛋白的表達。在對40例EN-NT/T-NT患者的隨訪及預後分析中得出PRDM1陽性表達與EN-NT/T-NT患者總體生存率及無病生存率呈正性相關。以上結果提示，腫瘤抑制因子PRDM1在EN-NT/T-NT中的表達下調受miR-223介導，其表達與EN-NT/T-NT的預後相關。下一步研究擬著重於PRDM1基因失活機制研究及基因的功能性研究，如基因突變、甲基化等方面的進一步深入研究。
